人参皂苷Rh1的生物活性及其定性定量分析

生物活性^【1】

1．抗肿瘤作用

在研究人参皂苷Rhl的整体及离体抗肿瘤作用中发现，空腹注射人参皂苷Rh，对小鼠宫颈癌一14具有明显的抑制作用(P<0．01)，在较高剂量(40mg／kg)时，对艾氏腹水癌细胞也有明显的抑制作用(P<0．01)，但对肉瘤一180和肝癌腹水型癌细胞无抗肿瘤作用。对MCF-7乳腺癌细胞，人参皂苷Rh1在50umol／L浓度下可活化雌激素反应性荧光素酶信使基因，且此作用可被特异性雌激素受体ICI 182、780抑制。

2．对免疫系统作用

人参皂苷Rh1对免疫功能低下模型小鼠的免疫调节作用的实验中发现人参皂苷Rh1低、中、高剂量组对小鼠的脾指数、Me吞噬功能均有明显的增强，同时也可显著促进ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖，而对脂多糖诱导的小鼠B淋巴细胞增殖无明显促进作用。

3. 抗变态反应和抗炎作用

在大鼠腹膜肥大细胞和1gE诱导的小鼠被动皮肤过敏性反应中，人参皂苷一Rhl对组胺释放有很强的抑制作用。在25mg·kg。1剂量下，人参皂苷一Rhl对小鼠被动皮肤过敏性反应的抑制率达87％，其作用强于色甘酸钠(同样剂量下的抑制率为31％)；在不同的扫描测热计上显示有膜稳定性作用。在离体RAW 264．7细胞模型，抑制诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶一2(COX一2)蛋白质表达；抑制核组分转录因子NF—kappaB活化。这些结果提示人参皂苷一Rh1的抗变态反应活性可能是由于其对细胞膜有稳定性作用和抗炎活性作用，从而改善变态反应所致炎症。

在鼠性腹腔巨噬细胞，人参皂苷一Rhl和人参皂苷―Rh2能明显降低rIFN—y加LPS刺激的NO生成，且呈剂量依赖性。但人参皂苷一Rb1、人参皂苷一Rc和人参皂苷一Re则对其无影响。预先用人参皂苷一Rh2处理鼠性腹腔巨噬细胞6h再用rIFN—y加LPS刺激，抑制作用效果更佳；同时，预先用人参皂苷一Rhz处理鼠性腹腔巨噬细胞6h再单独用IFN—y刺激，亦能有效地抑制NO生成。

在培养的3T3一L1脂肪细胞，人参皂苷能增加脂蛋白脂酶分泌进入培养基，且呈剂量依赖性。在100ug/mL浓度下，人参皂苷一Ro、一Re、一Rgl和一Rhl分别能增加119％、107％、56％和32％。培养基中与细胞内的脂酶活性比率为：对照组为4．7％、人参皂苷一R0处理组为8．6％、人参皂苷一Re处理组为8．3％、人参皂苷一Rg1处理组为7．0％、人参皂苷一Rh1处理组为6．3％。人参皂苷一Rb2在25ug/mL一浓度下的比率是16％，活性较强。但在100ug/mL和200ug/mL浓度下，人参皂苷一Rb2却降低脂酶活性分泌，与细胞内脂酶活性平行。人参皂苷一Rd亦降低脂酶活性分泌，且呈剂量依赖性。提示人参皂苷的苷元结构不同，其作用亦不同。

4. 对信号传导的影响

在NIH 3T3纤维原细胞，人参皂苷一Rh，和人参皂苷一Rh2抑制细胞增生；有效降低磷酸酯酶c的活性，继发降低细胞内甘油--fl旨(内源性蛋白激酶C的活化剂)，即降低了细胞内蛋白激酶c的活性。同时亦发现人参皂苷一Rhl和人参皂苷一Rh2能抑制细胞内作为蛋白激酶C主要基质之一的肉豆蔻酰丙氨酸富c激酶基质的磷酸化作用。这些结果提示人参皂苷一Rhl和人参皂苷一Rh2的抗增生作用是通过对磷酸酯酶C的抑制作用实现的。磷酸酯酶C是第二信使活化蛋白质激酶C所必要的。

5. 其他作用

人参皂苷一Rh．和原人参三醇对大鼠胃中的H+／K+一ATPase有弱的抑制作用。

体内代谢^【2】

取SD大鼠以50mg／kg灌胃给予人参皂苷Rhl(1)，给药6h后处死，在大肠中检出4个代谢产物，其中化合物4为主要代谢产物。

药代动力学^【2】

取SD大鼠以50mg／kg灌胃或5mg／kg静脉注射给予人参皂苷Rha，灌胃给药组收集0，0．03，0．08，0．17，0．33，0．50，1．0，2。0，4．0，6．0和8.0 h的血样，静脉注射组收集0，0．03，0．08，0．17，0．33，0．50，0．75，1．0，1．5，2．0，4．0和6．Oh的血样，分别测定，主要药代动力学参数见下表。

定性、定量分析^【2】

液相色谱一质谱联用法

色谱条件：色谱柱为VP—ODS C18柱(2．0mm×250mm，5um)，流动相为水(A)一乙腈(B)，20min内由体积比80：20线性梯度升至30：70，20～25min内由体积比30；70线性梯度降至80：20，维持A：B一80：20，等度洗脱5min，流速为0．2mL／min，柱温为35℃。

质谱条件：采用负离子方式检测，扫描质量范围：100  900(优／z)，雾化气(NEB)：1．5L／min，干气压力为0．1MPa，外加电压一3．5kV。

供试品制备：取SD大鼠随机分组，一组灌胃给予人参皂苷Rhl，剂量为50mg/kg，给药6h后处死。取大肠和肝脏迅速放入20％的组织匀浆中；另一组在给药0～24h内收集尿液和胆汁。所有样品用正丁醇萃取，备用。

参考文献

[1]杨秀伟编著,中药成分的吸收、分布、代谢、排泄、毒性及药效  上册,中国医药科技出版社,2006年8月,第1041页

[2] 刘斌著,中药成分体内代谢与分析,中国中医药出版社,2011.08,第251页