小鼠IgG

发布日期:2020/10/24 7:56:57

制备^[1]

小鼠IgG(immunoglobulin G)蛋白的制备：用纯化的基因工程抗原HIV-p24 免疫雌性 6 周龄BALB/C小鼠，每只小鼠免疫30μg 抗原，在四肢的淋巴结附近皮下多点注射，每间隔30d 免疫1 次，共3 次。第 1次与完全弗氏佐剂混合免疫，后两次与不完全福氏佐剂混合免疫。融合前3d 加强免疫1 次。用小鼠骨髓瘤SP2/0 细胞和免疫小鼠的脾细胞按常规 PEG 方法融合，有限稀释法克隆细胞，间接 ELISA 法筛选特异性抗体，阳性细胞连续克隆4次，直到抗体分泌阳性率达到 100%，确定为稳定的细胞株。间接 ELISA 法检测单抗细胞上清。将抗 HIV-p24 单抗细胞注射小鼠的腹腔，制备腹水。收获的腹水用50%饱和硫酸铵沉淀 1 次，再用30%饱和硫酸铵沉淀两次，沉淀蛋白溶于 pH=7.4 的 PBS 液中，进一步用 DEAE52离子交换纯化，调pH值为7.0，用紫外分光光度计测定抗体蛋白浓度，蛋白贮存液为1mg/mL。

不同小鼠 Ig G对丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫法检测的影响^[2]

不同厂家小鼠 Ig G分别配制成不同的抗 HCV-cAg酶结合物溶液，酶标法测定。结果见表 1。虽然每一厂家的标示浓度均>95% ，但由于制备方法、杂质含量、蛋白纯度不同等各种因素的影响，其检测结果不同。不同厂家小鼠 Ig G分别配制成不同的抗 HCV-cAg酶结合物溶液，破坏实验后用酶标法测定结果见表2。由于重金属杂质含量、小鼠 IgG与抗原结合程度不一致等各种因素的影响，其稳定性检测结果会有不同。