H-89二盐酸盐作用机制及制备

背景及概述

H-89二盐酸盐中文别名：N-[2-[P-溴苯丙烯盐基氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐，英文名称：H-89 dihydrochloride hydrate或N-[2-(p-Bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamide dihydrochloride，CAS号：130964-39-5，分子式：C20H24BrCl2N3O3S，分子量：537.298，熔点：195-200ºC，密度：1.436g/cm3，沸点：639.7639.7ºCat760mmHg，储存条件：2-8ºC，为灰白色粉末。其性状图如下：

图1 H-89二盐酸盐性状图

作用机制

H-89是一种蛋白激酶a抑制剂，也抑制其他几种激酶(对S6K1、MSK1、PKA、ROCKII、PKBα和MAPKAP-K1b,IC50值分别为80、120、135、270、2600和2800nM)。H-89通过竞争性抑制PKA催化亚基上的三磷酸腺苷(ATP)位点来阻断PKA的作用。蛋白激酶A的选择性抑制剂(环amp依赖性蛋白激酶)，抑制常数为0.0048uM。巨核细胞由造血细胞干细胞产生，并经有丝分裂向核内有丝分裂的转换，产生体积巨大多分叶核的多倍性细胞。然而，有丝分裂向核内有丝分裂转换的机制目前尚不清楚。我们以往的研究发现，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)下游重要靶分子核糖体蛋白S6激酶1(ribosomal protein S6 kinase 1，ＲPS6K1，S6K1)参与药物诱导的巨核细胞系多倍体化，然而其详细作用机制尚不十分清楚。研究使用SP600125诱导CMK细胞，成功地建立了巨核细胞的多倍体化模型，并发现cAMP依赖性蛋白激酶A(cAMP-dependent protein kinase A，PKA)抑制剂H-89可以阻断c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)抑制剂SP600125诱导的CMK细胞多倍体化，其作用是通过与SP600125调节S6K1翻译后修饰相反的方式实现。

制备

称取5-异喹啉磺酰氯及P-溴苯丙烯氯溶于180mL四氢呋喃，溶解后将溶液缓慢加入到冰水浴条件下的200mL乙二胺溶液中，立即有固体析出，加完后在35℃继续搅拌4小时，薄层色谱检测反应进度。等反应完成，反应液冷却后，再向反应中加400mL冰水，使产物析出完全，抽滤得浅黄色固体。干燥后用无水乙醇溶解，滴加稀盐酸，有固体析出，丙酮重结晶，得到白色固体H-89二盐酸盐。

参考文献

[1] Ma D，Yu H，Lin D，et al． S6K1 is involved in polyploidization through its phosphorylation at Thr421/Ser424［J］． J Cell Physiol，2009，219(1): 31－44．