1-(N-BOC)-4-(N-FMOC-氨基)-4-哌啶甲酸的制备和应用

发布日期:2022/1/17 13:49:27

背景及概述^[1]

1-(N-BOC)-4-(N-FMOC-氨基)-4-哌啶甲酸是一种医药中间体，可由N-BOC-4-氨基-4-羧酸哌啶为原料，与Fmoc-Cl反应制备得到。有文献报道其可用于制备RET抑制剂。

制备^[1]

反应瓶中加入化合物1(17g,69.6mmol)和无水二氯甲烷(500ml)，搅拌，再加入N,N-异丙基乙胺(22.5g,174mmol)，室温条件下搅拌30分钟，缓慢滴加入三甲基氯硅烷(15.1g,140mmol)，然后加热至回流反应3h，期间每30分钟氩气鼓泡30秒，以去除反应产生的氯化氢气体。将反应冷却至-10℃，加入Fmoc-Cl(16.7g，64.6mmol)、EDCI·HCl(21.1g,0.11mol)，继续搅拌3h，期间每30分钟氩气鼓泡30秒，以去除反应产生的氯化氢气体。反应液加入2.5％Na2CO3水溶液(1000ml)，用乙醚(100ml x 2)萃取，水相用2N盐酸调整pH到2，用乙酸乙酯(300ml x 3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到化合物9307A1，即1-(N-BOC)-4-(N-FMOC-氨基)-4-哌啶甲酸(24.4g，85％，白色泡沫状固体)，不纯化直接进行下一步反应。LCMS:De-Boc[M+H]+367.08。

应用^[1]

1-(N-BOC)-4-(N-FMOC-氨基)-4-哌啶甲酸可用于制备化合物(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-羰基-3-(1-苯基乙基)-1,3,8-三氮杂螺[4.5]癸-1-烯-8-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，该化合物是一种RET激酶抑制剂。RET基因由Takahashi等(Takahashi M，Ritz J，Cooper GM.Activation of anovel human transforming gene，ret，by DNArearrangement.Cell,1985,42(2)：581-588)在转化培养的小鼠NTH3T3细胞中发现，并被命名为RET基因。RET基因是位于10号染色体长臂上的原癌基因(10q11.2)，编码的RET蛋白是一种酪氨酸激酶受体，由富含半胱氨酸的钙黏素样胞外区、跨膜区以及具有酪氨酸激酶活性的胞内域三部分构成，与ALK激酶域有37％氨基酸相同。RET蛋白通过配体与受体的结合，刺激受体二聚化，胞内区域发生自身磷酸化和细胞内底物磷酸化，从而激活下游信号，在细胞的增殖、迁移和分化过程中起重要作用。

RET在正常生理状态下与肾的发育和胃肠神经系统发育有关，但是，RET基因的突变导致不依赖配体的，组成型的RET激酶异常激活，将导致肿瘤发生。RET激酶的激活主要有两种机制：1.RET基因点突变；2.RET基因重排。RET的错义突变可能发生在胞外的Cys残基上(如：C620R，C634R/W)，引起异常的激酶激活。突变也可能发生在胞内激酶活性域(如：V804L/M，M918T)，这种突变将促进不依赖配体的RET激酶激活(Romei C,Ciampi R,EliseiR.A comprehensive overview of the role of the RET proto-oncogene in thyroidcarcinoma.Nat Rev Endocrinol 2016；12:192-202.)。甲状腺髓样癌(MTC)中RET的点突变非常常见，存在于大约50％的散发性MTC及几乎所有的家族性MTC中。RET基因通过本身断裂与其他基因接合的方式发生重组，成为一个新的融合基因，使RET酪氨酸激酶的活化逃脱配体的调控，进一步自我磷酸化，从而增强信号转导功能，促使激酶活化，引发肿瘤生成。在10-20％的甲状腺乳头状癌(PTC)中，1-2％的非小细胞肺癌(NSCLC)和很多其他癌症，如结肠癌和乳腺癌中都存在RET融合。以上结果表明：RET信号通路的失调是很多肿瘤疾病的重要驱动原因。