胞磷胆碱的制备

背景及概述^[1][2][3]

20 世纪 50 年代 K ennedy 等发现了胞磷胆碱，随后进行化学合成并确定其分子结构。1957年Kennedy的研究证实其在脑磷脂质的合成中至关重要，1961年日本武田制药公司开发生产出胞磷胆碱钠，并于1988年在我国注册。胞磷胆碱钠原料药已被中国药典2005版二部收载，目前国内已有多家药厂生产上市，并有3家进口：日本协和、武田、意大利Pro.Bio.Sint公司。

目前，临床上使用以胞磷胆碱钠注射剂为主，口服制剂有胞磷胆碱钠口服液和胞磷胆碱钠胶囊。胞磷胆碱钠是内源性合成磷脂酰胆碱的中间体，是构建生物膜的重要成分。中枢神经损伤后，胞磷胆碱钠参与修复和再生，起神经保护作用；在神经介质的转移和生物电的传导中也起重要作用。

胞磷胆碱钠在临床上主要用于头部外伤及脑术后伴有意识障碍、脑梗塞急性意识障碍、促进脑卒中偏瘫患者上肢功能恢复及急性胰腺炎等病症，对急性中风、外科手术后引起的神经损伤、意识障碍，对帕金森综合症、痴呆症、青光眼等有明显的临床治疗效果。胞磷胆碱钠为目前临床用量的神经激活剂，具有以下特点：(1)降低脑血管阻力，增加脑血流，促进脑物质代谢，改善脑循环；(2)增强脑干网状结构的机能，增强锥体系统机能，改善运动麻痹，促进卵磷脂合成，改善脑代谢，可与脑多肽合用，对改善脑功能有协同作用。

适应症^[4]

主要适应症 为急性颅脑外科及脑手术后意识障碍；临床上还用于其它中枢神经系统急性损伤引起的功能和意识障碍、震颤麻痹、耳鸣和神经性耳聋、安眠药中毒等；近年临床上广泛用于缺血性脑中风、脑动脉硬化、多梗塞性痴呆、老年痴呆症、小儿病毒性脑炎等。

规格^[4]

片剂：100 mg。注射液：200 mg/2 ml，250 mg/2 ml。

用法用量^[4]

口服，每次2片（0.2g），每日3次，温开水送服。

静脉滴注：一日0.25～0.5g，用5%或10%葡萄糖注射液稀释后缓缓滴注，每5~10日为一疗程；单纯静脉注射：每次100~200mg。肌内注射：一日0.1～0.3g，分1～2次注射。

药理作用^[5]

胞磷胆碱是磷脂生物合成的中间产物，存在于所有细胞中，是磷脂合成的主 要辅酶，通过促进卵磷脂的合成而改善脑的功能，表现为意识状态改善、大脑血流量增加及对氧的摄 取明显提高。通过增加脑血流量，改善脑代谢和催醒。

药代动力学^[4]

尚无胞磷胆碱钠口服给药的人体药代动力学资料。文献资料显示，胞磷胆碱钠注射给药后血药浓度迅速下降，30分钟降至注入时的 1/3，1-2 小时基本稳定，分布以肝内最多，占10%，大部分于2小时内排入尿中，本品较难通过血脑屏障，进入脑内的药物很少，仅占0.1%，但药物在脑内停留时间很长，注射后3小时内药物浓度达峰值，并在24小时内保持不变，而且损伤脑比正常脑、受损半球比未受损半球的胞磷胆碱含量明显升高。

不良反应^[4]

偶见胃肠道反应，轻微，持续时间短

药物相互作用^[4]

服用本品不可与有氯酯醒的药物合用。

注意事项^[4]

使用本品前，请仔细阅读药品说明书；应遵医嘱使用。

禁忌^[4]

服用本品不可与有氯酯醒的药物合用

制备 ^[3][6]

方法1：以5’-胞苷酸和磷酸胆碱作为反应物、以酵母作为生物催化剂生物合成胞磷胆碱钠，反应流程为：

方法2：一种固定化酶催化生产胞磷胆碱钠的方法，包括如下步骤：

1）工程菌发酵：

把分子克隆胞苷磷酸转移酶基因的大肠杆菌工程菌的种子液接种到培养基体系中培养26～32小时，所述分子克隆胞苷磷酸转移酶基因的大肠杆菌工程菌的种子液的加入体积为培养基体系体积的5%～10%；期间补充适量的葡萄糖、蛋白胨以及酵母提取物，发酵完成后发酵液离心收集菌体。

2）制备胞苷磷酸转移酶清液：

取上述菌体悬浮在磷酸缓冲液中用超声波或匀浆仪破碎，获得破碎液，在上述破碎液中加入硫酸铵进行盐析，获得饱和度为25%～45%盐析液，再用孔径为100～500nm的陶瓷膜过滤器将上述盐析液固液分离，得胞苷磷酸转移酶清液，其中，所述菌体与所述磷酸缓冲液的悬浮比 例为1：4～1：10。

3）胞苷磷酸转移酶清液的固定化：

上述胞苷磷酸转移酶清液中加入固定化载体，搅拌固化，获得固定化胞苷磷酸转移酶，所述固定化载体的加入量与胞苷磷酸转移酶清液的比例为100～200克/L。

4）胞磷胆碱钠的合成：

将含三磷酸胞苷二钠30～80mmol/L、磷酸胆碱60～400mmol/L以及乙酸镁10～50mmol/L的水溶液混合配制成合成反应液，调节合成反应液的 pH值至6.0～9.0，加入固定化胞苷磷酸转移酶，并在10～50℃的水浴温度下搅拌反应4～10小时，过滤后得到的清液即为胞磷胆碱钠液，所述固定化胞苷磷酸转移酶的加入量与合成反应液的比例为10～50g/L。

5）提取纯化

将上述胞磷胆碱钠液经层析分离结晶干燥，得到胞磷胆碱钠的干品。

主要参考资料

[1] 周昌奎; 吴晓华. 神经保护剂——胞磷胆碱的研究进展. 中国生化药物杂志, 2004, 25.4: 255-256.

[2] 陈谦. 胞磷胆碱在临床治疗中的应用[J]. 天津药学, 2012, 24(5): 60-63.

[3] 胡建荣.一种胞磷胆碱钠化合物及其新方法. CN201010578120.1 ，申请日20101202

[4] 胞磷胆碱说明书

[5] 汤忠平, 李伟琳, 唐集敏, 等. 胞磷胆碱在神经科的临床应用[J]. 中国现代药物应用, 2014, 8(17): 225-227.

[6] 刘桂祯；黄炯威；周华润；莫世艺；劳瑞雄. 一种固定化酶催化生产胞磷胆碱钠的方法. CN201310167034.5，申请日20130508