基质金属蛋白酶-3(抗体)的应用

背景^[1-3]

基质金属蛋白酶-3(抗体)是一类可以特异性结合基质金属蛋白酶-3蛋白的多克隆抗体，主要用于检测基质金属蛋白酶-3蛋白的免疫学实验。

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase），基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。

基质金属蛋白酶-3免疫组化

其家族成员具有相似的结构，一般由5个功能不同的结构域组成:（1）疏水信号肽序列;

（2）前肽区，主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后，MMPs酶原被激活;

（3）催化活性区，有锌离子结合位点，对酶催化作用的发挥至关重要;

（4）富含脯氨酸的铰链区;

（5）羧基末端区，与酶的底物特异性有关。其中酶催化活性区和前肽区具有高度保守性。MMPs成员上述结构的基础上各有特点。

各种MMP间具有一定的底物特异性，但不是绝对的。同一种MMP可降解多种细胞外基质成份，而某一种细胞外基质成分又可被多种MMP降解，但不同酶的降解效率可不同。

MMP-3和MMP-10能作用于PG、LN、FN、Ⅲ型和Ⅳ型胶原及明胶。且MMP-3能够激活MMP-1和其他家族成员。MMP-7能作用于明胶和FN。MMP-1的产生范围较广，可由基质纤维母细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞产生。正常情况下MMP-1阳性率很低，但在各种刺激下可高表达。

应用^[4][5]

用于骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导关节炎大鼠白细胞介素-22及基质金属蛋白酶-3表达的影响研究

异体骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导关节炎大鼠血清及关节滑膜白介素-22（IL-22）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）表达的影响。

方法:两次注射Ⅱ型胶原建立胶原诱导关节炎（CIA）大鼠模型,48只大鼠随机分为3组:空白对照组,CIA对照组,CIA实验组;

贴壁筛选法培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,并鉴定,其余按1×107/kg注入实验组大鼠体内;

酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫组化分别检测各组大鼠血清、踝关节IL-22及MMP-3表达量;

分离并培养各组大鼠膝关节滑膜细胞,并给予不同浓度IL-22刺激,蛋白质印迹及实时定量聚合酶链反应分别检测IL-22刺激前后MMP-3蛋白及mRNA表达量。

两组间比较采用单因素方差分析,独立样本t检验,P<0.05为差异具有统计学差异。

结果:MSCs移植后,CIA大鼠关节炎指数、X线、HE染色均显示关节破坏较对照组明显减轻;

ELISA结果示CIA对照组IL-22、MMP-3表达量最高,与正常对照组（125.79±9.12 VS 102.00±7.63ng/ml,P<0.05）、（292.35±31.23 VS 257.27±13.99 ng/ml,P<0.05）及CIA实验组（125.79±9.12 VS 97.94±9.50 ng/ml,P<0.05）、（292.35±31.23 VS 262.16±22.02 ng/ml,P<0.05）相比差异有统计学意义（P<0.05）,空白对照组与CIA实验组差异无统计学意义;

免疫组化结果与ELISA结果一致;Western-blot、PCR结果示IL-22刺激后MMP-3蛋白及mRNA表达量增高,表达量与刺激量呈剂量依赖性。

参考文献

[1]PPARβ/δdirects the therapeutic potential of mesenchymal stem cells in arthritis[J].P Luz-Crawford,N Ipseiz,G Espinosa-Carrasco,A Caicedo,G Tejedor,K Toupet,J Loriau,C Scholtysek,C Stoll,M Khoury,D Noel,C Jorgensen,G Kronke,F Djouad.Annals of the Rheumatic Diseases.2016(12)

[2]Safety,tolerability and potential efficacy of injection of autologous adipose-derived stromal vascular fraction in the fingers of patients with systemic sclerosis:an open-label phase I trial[J].Granel Brigitte,Daumas Aurélie,Jouve Elisabeth,HarléJean-Robert,Nguyen Pierre-Sébastien,Chabannon Christian,Colavolpe Nathalie,Reynier Jean-Charles,Truillet Romain,Mallet Stéphanie,Baiada Antoine,Casanova Dominique,Giraudo Laurent,Arnaud Laurent,Veran Julie,Sabatier Florence,Magalon Guy.Annals of the Rheumatic Diseases.2015(12)

[3]Mesenchymal stem cells and rheumatic diseases:new tools from pathogenesis to regenerative therapies[J].Paola Cipriani,Piero Ruscitti,Paola Di Benedetto,Francesco Carubbi,Vasiliki Liakouli,Onorina Berardicurti,Francesco Ciccia,Giovanni Triolo,Roberto Giacomelli.Cytotherapy.2014

[5]刘贵艳.骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导关节炎大鼠白细胞介素-22及基质金属蛋白酶-3表达的影响[D].山西医科大学,2017.