蜂毒明肽的原核表达及纯化

背景及概述^[1]

蜂毒明肽占蜂毒干重3%，是蜂毒中一种重要的多肽。蜂毒明肽是动物神经毒素中最小的神经毒肽，可以通过各种给药途径，穿过血脑屏障，作用于中枢神经，是引起各种神经症状的主要多肽。强直性肌营养不良者，有蜂毒明肽受体，因此，蜂毒明肽对肌营养不良者有治疗作用。

原核表达及纯化^[1]

吉林大学再生医学科学研究所生物技术药物教研室朱文赫原核表达并纯化了蜂毒明肽。方法：人工合成蜂毒明肽基因,与肠激酶识别序列基因串联,插入原核表达载体pGEX-2T中,构建蜂毒明肽与谷胱甘肽硫转移酶的融合表达载体pGEX-APAM。将重组质粒转化E.coliBL21（DE3）,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westernblot鉴定,并进行纯化和肠激酶切割。结果：经Westernblot鉴定,表达产物具有良好的反应原性。在优化的表达条件下,融合蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25.8%,且大部分以可溶性形式存在。纯化的融合蛋白纯度大于95%,每毫克融合蛋白经肠激酶切割后,可得蜂毒明肽58.5μg,回收率为81.9%。结论：已成功地原核表达并纯化了蜂毒明肽。

应用^[2]

CN201711313052.4提供了一种抗炎杀菌、预防和治疗龋病的口腔护理组合物。该组合物包含富勒烯及其衍生物、蜂胶、精制蜂毒及提取物作为活性物质。优选的，所述富勒烯及其衍生物包含富勒烯羟基化衍生物和富勒烯氨基酸衍生物，所述精制蜂毒提取物包含蜂毒肽、托肽平和蜂毒明肽。所述口腔护理组合物采用纯植物花精油作为香味调节剂，无任何毒副作用。本发明所述的口腔护理物具有有效的抗炎、杀菌、预防和治疗龋病的功效，其表现形式可以是洁牙剂或口腔清洗剂，具体可以是牙膏、漱口水、凝胶剂等。本发明还提供了口腔护理物的制备和使用方法。

参考文献

[1]朱文赫,王涵,孙妙囡,孙德军.蜂毒明肽的原核表达及纯化[J].中国生物制品学杂志,2009,22(10):971-974.

[2]CN201711313052.4一种抗炎杀菌、预防和治疗龋病的口腔护理组合物