Β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1抗体的应用

背景^[1-3]

Β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1抗体是可以特异性结合Β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1的一类多克隆抗体，主要用于样本中Β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1的检测实验。

β-淀粉样蛋白（amyloidβ-protein，Aβ）分子量约4kDa，由β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)水解而来，由细胞分泌，在细胞基质沉淀聚积后具有很强的神经毒性作用。

β淀粉样蛋白结构图

β淀粉样蛋白(amyloid-β，Aβ)是由淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)经β-和γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有39～43个氨基酸的多肽。它可由多种细胞产生，循环于血液、脑脊液和脑间质液中，大多与伴侣蛋白分子结合，少数以游离状态存在。人体内Aβ最常见的亚型是Aβ1～40和Aβ1～42。在人脑脊液和血中，Aβ1～40分别比Aβ1～42的含量水平高10倍和1．5倍，Aβ1～42具有更强的毒性，且更容易聚集，从而形成Aβ沉淀的核心，引发神经毒性作用。

Aβ的沉积不仅与神经元的退行性病变有关，而且可以激活一系列病理事件，包括星型胶质细胞和小胶质细胞的激活、血脑屏障的破环和微循环的变化等，是AD病人脑内老年斑周边神经元变性和死亡的主要原因。

应用^[4][5]

用于三七总皂苷对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑β淀粉样蛋白代谢通路影响的研究

以快速老化痴呆模型小鼠SAMP8为动物模型,观察PNS对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑中直接影响APP生成量的NF-κB转录因子和影响APP分解代谢为Ap相关分泌酶水平,弄清PNS影响Ap代谢途径的部位和环节,阐明PNS抑制Ap及其前体蛋白表达的作用机制,为开发PNS治疗老年性痴呆提供更多的科学依椐。

方法：1.将快速老化痴呆模型小鼠SAMP8随机分为对照组、PNS高剂量组（200mg·kg-1）、低剂量组（100mg·kg-1）、石杉碱甲组（0.03mg·kg-1）,每组15只,另留10只（模型组）在给药前进行检测记忆和行为检测,以检验SAMP8模型是否成功。PNS和石杉碱甲均以双蒸水调配后灌胃给药,对照组给予药物组相同容积的双蒸水。每天灌胃1次,连续给药2个月。

2. 利用Morris水迷宫方法和病理组织检查联合检测PNS对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力影响和海马神经元损伤。

3. 采用实时荧光定量PCR技术对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑中NF-κB转录因子P50、α-分泌酶ADAM（ADAM10、ADAM17和ADAM9）、β-分泌酶BACE1、γ-分泌酶Aph-1和早老素PSl和PS2mRNA进行定量分析,了解上述基因的表达差异。

4. 采用直接荧光法和ELISA法检测快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑α-分泌酶、β-分泌酶和γ-分泌酶的活性。

5. 采用免疫组化和Western blot方法检测快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑NF-κB转录因子P50,α-分泌酶ADAM（ADAM10、ADAM17和ADAM9）、β-分泌酶BACE1、γ-分泌酶Aph-1和早老素PSl和PS2蛋白的表达水平。

6. 采用HE染色法观察快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑小胶质细胞的活动状态。

7.采用ELISA法检测快速老化痴呆模型小鼠SAMP8血清炎症因子IL-1p的含量变化。

参考文献

[1]Expression of APP pathway mRNAs and proteins in Alzheimer’s disease[J].Toshifumi Matsui,Martin Ingelsson,Hiroaki Fukumoto,Karunya Ramasamy,Hisatomo Kowa,Matthew P.Frosch,Michael C.Irizarry,Bradley T.Hyman.Brain Research.2007

[2]Association studies between common variants in prolyl isomerase Pin1 and the risk for late-onset Alzheimer’s disease[J].Petra Nowotny,Sarah Bertelsen,Anthony L.Hinrichs,John S.K.Kauwe,Kevin Mayo,Sarah Jacquart,John C.Morris,Alison Goate.Neuroscience Letters.2007(1)

[3]A Hundred Years of Alzheimer’s Disease Research[J].John Hardy.Neuron.2006(1)

[4]The senescence-accelerated prone mouse（SAMP8）:A model of age-related cognitive decline with relevance to alterations of the gene expression and protein abnormalities in Alzheimer’s disease[J].D.Allan Butterfield,H.Fai Poon.Experimental Gerontology.2005(10)

[5]黄金兰.三七总皂苷对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8大脑β淀粉样蛋白代谢通路影响的研究[D].广西医科大学,2013.