芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体的应用

背景^[1-3]

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体是可以特异性结合芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3的一类多克隆抗体，主要用于芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3的体外检测。

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体经x线晶体衍射结构分析发现，Ig由四条多肽链组成，各肽链之间南数量不等的链间二硫键连接。Ig可形成“Y”字型结构，称为Ig单体，是构成抗体的基本单位。在一定条件下，Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶，并可籍此研究Ig的结构和功能，分离和纯化特定的12多肽片段。

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3免疫组化图

AADACL3是一种具有350个氨基酸的蛋白质，属于“GDXG”脂解酶家族，参与水解酶的活性。AADACL3存在两种交替剪接的同工型，由一个映射到人类染色体1p36.21的基因编码。的人类染色体1号染色体占人类基因组的8％，包含约2.6亿个碱基对，编码3,000个基因。染色体1包含大量与疾病相关的基因，包括与家族性腺瘤性息肉病，Stickler综合征，帕金森氏病，Gaucher病，精神分裂症和Usher综合征有关的基因。1号染色体的畸变存在于多种癌症中，包括头颈癌，恶性黑色素瘤和多发性骨髓瘤。

应用^[4][5]

用于拟南芥氨基脱氧分支酸裂解酶的生物学功能研究

植物中叶酸的合成过程涉及两个分支：pABA分支和喋啶分支。氨基脱氧分支酸裂解酶（ADCL）在pABA分支中催化氨基脱氧分支酸（ADC）芳香化为pABA。本论文是以突变体Atadcl为材料,分别用基因突变、RNAi、超表达和原核表达的方法来探讨拟南芥中氨基脱氧分支酸裂解酶（AtADCL）的生物学功能。

主要研究结果如下：基因AtADCL在拟南芥生长的各个时期、各个组织中普遍表达。从ABRC订购了T-DNA插入突变体SALK111981。经PCR鉴定得到了AtADCL的纯合突变体,命名为Atadcl,并分析了基因AtADCL的转录水平的表达情况。

当采用跨T-DNA插入位点的基因特异性引物时突变体Atadcl中该基因的转录本几乎检测不到；当采用不跨T-DNA插入位点的基因特异性引物时突变体中的转录本丰度与野生型相比明显下降。

突变体Atadcl在营养生长和生殖生长阶段与野生型并无明显差异。统计了不同发育时期的莲座叶叶片数目,发现突变体与野生型的莲座叶叶片数目没有差异。在黑暗诱导离体叶片凋亡的过程中,突变体与野生型的叶片凋亡速率无明显差异。

生长在正常1／2 MS和氮限制培养基上的突变体幼苗的状态均比野生型好,而且,RT-PCR分析显示参与氮代谢途径中的某些基因在突变体中的转录本丰度比同样条件下的野生型中的高。

参考文献

[1]Folate biofortification in food plants[J].Samir Bekaert,Sergei Storozhenko,Payam Mehrshahi,Malcolm J.Bennett,Willy Lambert,Jesse F.Gregory,Karel Schubert,Jeroen Hugenholtz,Dominique Van Der Straeten,Andrew D.Hanson.Trends in Plant Science.2007(1)

[2]The diverse members of the mitochondrial carrier family in plants[J].Ilka Haferkamp.FEBS Letters.2007(12)

[3]Trienzyme Extraction in Combination with Microbiologic Assay in Food Folate Analysis:An Updated Review[J].Taisun H.Hyun,Tsunenobu Tamura.Experimental Biology and Medicine.2005(7)

[4]Investigation of the extraction behavior of the main monoglutamate folates from spinach by liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry[J].Guo-Fang Zhang,Sergei Storozhenko,Dominique Van Der Straeten,Willy E.Lambert.Journal of Chromatography A.2005(1)

[5]常娜宁.拟南芥氨基脱氧分支酸裂解酶的生物学功能研究[D].兰州大学,2010.