达沙替尼的制备方法和适应症

背景及概述^[1]

达沙替尼(Dasatinib)，别名Sprycel，是一种灰白至黄色固体的化学品。化学名称 N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻 唑甲酰胺，分子式为C22H26ClN7O2S，分子量为488.01。达沙替尼为抗肿瘤药，临床上主要治疗对甲磺酸伊马替尼耐药，或不耐受的费城 染色体阳性(Ph+)慢性髓细胞白血病(CML)慢性期、加速期和急变期(急粒变和急淋变)成年患者。

制备^[1]

一种达沙替尼的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰 胺：室温下，将1.50kg 2-氨基-N-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺、1.11kg 4,6- 二氯-2- 甲基嘧啶加入到50L反应釜中，加入13.35kg四氢呋喃，氮气保护,搅拌降温至-5℃～10℃， 反应液温度保持在-5℃～10℃，分次向反应液中加入叔丁醇钠固体，叔丁醇钠固体的总量 为2.13kg，加入方式为每20-30min加料一次，每次不多于总量的10％且最多不多于200g，加 完后使反应液在-5℃～10℃下反应1～2h，将反应液后升温至10℃～30℃，搅拌反应液，至 HPLC检测2-氨基-N-(2-氯-6-甲基苯基)-5-噻唑酰胺/N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2- 甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺的量低于1.5％，将反应液降温至-10℃～10℃，滴加 浓度为4mol/L的盐酸，调节体系pH至6～7，滴加完毕后在-10℃～10℃继续搅拌1～2h，过 滤，滤饼用适量水、甲醇洗涤，滤饼在50～60℃真空干燥，得到N-(2-氯-6-甲基苯基)-2- [(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺1.636kg，收率74.06％；

(2)制备达沙替尼粗品：常温下，将1.60kg步骤(1)所得的N-(2-氯-6-甲基苯基)- 2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻唑甲酰胺和1.056kgN-羟乙基哌嗪、0.432kg三乙 胺加入50L反应釜中，加入5.60kg N-甲基吡咯烷酮，氮气保护，将反应液搅拌升温至70～75 ℃，继续搅拌，待HPLC检测N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[(6-氯-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-5-噻 唑甲酰胺/达沙替尼的量低于0.5％时，开始降温，降温至15～30℃，加入22.4kg二氯甲烷， 搅拌0.5～1.0h，过滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷洗涤，50～60℃真空干燥4～6h，干燥 后的滤饼加入反应釜，加入5.60kg N-甲基吡咯烷酮，升温至35～45℃搅拌溶清，过滤物料， 所得滤液加入反应釜，搅拌下加入19.2kg二氯甲烷后，降温至15～30℃搅拌0.5～1.0h，过 滤物料，所得滤饼用适量二氯甲烷淋洗后，50～60℃真空干燥得到达沙替尼粗品1.9kg，收 率96％；

(3)精制达沙替尼：将1.90kg步骤(2)所得的达沙替尼粗品和45.0kg无水甲醇加入 反应釜，搅拌，氮气置换，边搅拌边升温至回流，再搅拌1～2h，降温至59～63℃加入晶种，并 在59～63℃下搅拌0.5～1h，然后采取匀速降温的 方式降温，每10min降温2-5℃，将温度降 至5～10℃后，恒温搅拌0.5～1h，过滤物料，所得滤饼用适量甲醇淋洗后，滤饼采用梯度升 温的方式进行干燥，先在38～42℃下干燥至滤饼恒重，再升温至48～52℃真空干燥至滤饼 恒重，最后升温至76～80℃真空干燥至滤饼恒重，即得到达沙替尼终产品1.252kg，收率 65.9％，HPLC检测杂质含量小于0.1％。

适应症^[2]

本品用于治疗对甲磺酸伊马替尼耐药，或不耐受的费城染色体阳性(Ph+)慢性髓细胞白血病(CML)慢性期、加速期和急变期（急粒变和急淋变）成年患者。

药理作用^[2]

药效学特点药物治疗学分组：蛋白激酶抑制剂，ATC编码：LOIXE06达沙替尼抑制BCR-ABL激酶和SRC家族激酶以及许多其它选择性的致癌激酶，包括c-KIT、ephrin(EPH)受体激酶和PDGF β受体。达沙替尼是一种强效的、次纳摩尔(subnanomolar)的BCR-ABL激酶抑制剂，其在0.6-0.8nM的浓度下具有较强的活性。它与BCR-ABL酶的无活性及有活性构型均可结合。体外研究中，达沙替尼在表达各种伊马替尼敏感和耐药疾病的白血病细胞系中具有活性。这些非临床研究的结果表明，达沙替尼可以克服由下列原因导致的伊马替尼耐药：BCR-ABL过表达、BCR-ABL激酶区域突变、激活包括SRC家族激酶(LYN，HCK)在内的其他信号通道，以及多药耐药基因过表达。此外，达沙替尼可在次纳摩尔浓度下抑制SRC家族激酶。在使用鼠CML模型所单独进行的体内试验中，达沙替尼能够防止慢性期CML向急变期的进展，同时延长了荷瘤小鼠（源于生长在不同部位的患者CML细胞系，包括中枢神经系统）的生存期。

毒理研究^[2]

临床前安全性数据在一系列基于小鼠、大鼠、猴和家兔进行的体外和体内试验中对达沙替尼的非临床安全性特点进行了评价。主要毒性发生在胃肠道、造血系统和淋巴系统。在大鼠和猴中发生的胃肠道毒性为剂量限制性毒性，原因是肠道始终是一个靶器官。在大鼠中，伴随着骨髓的变化，红细胞指标出现了最少至轻度的降低；类似的变化还出现在猴中，但是发生率更低。发生在大鼠中的淋巴毒性包括淋巴结、脾脏和胸腺的淋巴耗竭，以及淋巴器官重量降低。胃肠道、造血系统和淋巴系统的改变在停止治疗后都是可逆的。在治疗最多9个月的猴中发生的肾脏改变仅限于基础的肾脏矿化作用的增加。在一项针对猴的急性、单次口服给药研究中观察到皮肤出血，但是在针对猴或大鼠的重复给药研究中未观察到该现象。在大鼠中，达沙替尼可在体外抑制血小板聚集并在体内延长表皮出血时间，但是不会导致自发性出血。在应用hERG和浦肯野纤维法进行的体外达沙替尼活性分析表明，该药可能会延长心室复极(QT间期)。然而，一项基于猴（清醒状态下接受遥测）的单次给药研究中，QT间期或ECG波形未发生变化。达沙替尼在体外细菌细胞分析（Ames试验）中不具有致突变性，同时，在一项体内大鼠微核研究中也不具有遗传毒性。达沙替尼在体外对分裂的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞具有致畸性。尚未研究达沙替尼对男性和女性生育力的影响。然而，在多个种属中完成的重复剂量毒性研究结果提示，达沙替尼可能会潜在地损害生殖功能和生育力。在雄性动物中获得的作用证据包括精囊体积减小，分泌下降以及前列腺、精囊和睾丸不成熟。达沙替尼给药引起猴子宫炎症和矿化，以及啮齿类动物的卵巢囊肿和卵巢肥大。在一项常规的大鼠生殖力和早期胚胎发育研究中，达沙替尼并未影响雄性和雌性大鼠的生殖力，但是在接近人体临床暴露的剂量水平下导致了胚胎死亡。在胚胎胎儿发育研究中，达沙替尼同样也导致了胚胎死亡，同时伴有大鼠产仔数的降低以及大鼠和家兔中胎儿骨骼的改变。这些效应均发生在不会导致母体毒性的剂量水平下，表明达沙替尼在着床至器官形成这段时间内是一种选择性的生殖毒物。在小鼠中，达沙替尼可以导致免疫抑制，该效应与剂量相关，且通过剂量降低和/或给药方案的改变可以有效地处理。在一项针对小鼠成纤维细胞的体外中性红摄取光毒性试验中，达沙替尼具有光毒性的可能。雌性裸鼠单次口服达沙替尼，使其暴露达到最多3倍于人接受推荐的治疗剂量(根据AUC)后的暴露时，被认为在体内不具有光毒性。尚未进行针对达沙替尼的致癌性研究。

药代动力学^[2]

基于229例健康成年受试者和106例患者（包括22例中国患者）评价了达沙替尼的药代动力学。吸收：达沙替尼经口服后可被快速吸收，在0.5-3小时内达到峰值浓度。口服后，在25mg至120mg，每日2次的剂量范围内，平均暴露(AUCτ)的增加大约与剂量的增加呈正比。患者中达沙替尼的总体平均终末半衰期大约为5-6小时。来自健康受试者的数据表明，在高脂饮食30分钟后单次给予100mg的达沙替尼可使达沙替尼的平均AUC增加14%。服用达沙替尼30分钟前给予低脂饮食可使达沙替尼的平均AUC增加21%。所观察到的食物作用并不能代表与临床相关的暴露的改变。分布：在患者中，达沙替尼具有较大的表观分布容积(2505L)，表明该药物可以广泛地分布于血管外。体外试验表明，达沙替尼在临床相关的浓度下与血浆蛋白结合率大约为96%。代谢：达沙替尼在人体被广泛地代谢，有多个酶参与了代谢产物的形成。在接受100mg的[14C]标记的达沙替尼的健康受试者中，原形达沙替尼占血浆中循环放射性的29%。血浆浓度和在体外测定的活性表明，达沙替尼的代谢产物不太可能在所观察到的药物药理学活性中发挥主要作用。CYP3A4是主要负责达沙替尼代谢的酶。达沙替尼是CYP3A4的一种较弱的时间依赖性抑制剂。在临床相关的浓度下，达沙替尼不能抑制CYPIA2、2A6、286、2C8、2C9、2C19、2D6或2EI。达沙替尼不是人类CYP酶的诱导剂。清除：该药主要通过粪便清除，大部分是以代谢产物的形式。单次口服[14C]标记的达沙替尼后，大约89%剂量在10天内清除，其中分别有4%和85%放射性从尿液和粪便中回收。原形的达沙替尼分别占尿液和粪便中剂量的0.1%和19%，其余的剂量为代谢产物。肝肾功能损害：一项达沙替尼单剂量药代动力学研究本品对肝功能损害的影响，该研究比较了8名中度肝损害受试者接受50mg剂量，5名重度肝损害受试者接受20mg剂量，其剂量相当于健康受试者接受70mg剂量。对于相当于调整剂量为70mg的中度肝损害受试者，其达沙替尼平均Cmax和的AUC与正常肝功能受试者相比，分别减少了47%和8%。对于相当于调整剂量为70mg的重度肝损害受试者，其达沙替尼平均Cmax和的AUC与正常肝功能受试者相比，分别减少了43%和28%。达沙替尼及其代谢产物很少通过肾脏清除。

参考文献

[1] [中国发明] CN201710514943.X 一种达沙替尼的制备方法

[2] 达沙替尼片说明书