L-精氨酸甲酯二盐酸盐的制备和应用

背景及概述^[1]

L-精氨酸甲酯二盐酸盐简称Arg·Oet·2HCl，可由L-精氨酸盐酸盐与甲醇酯化后得到。L-精氨酸甲酯二盐酸盐可用于制备精氨酸衍生物Fmoc-Arg(Pbf)-OH。

制备^[1]

a1.将100L无水乙醇加入预先干燥的300L反应釜内，通冰盐水降温至-5～-10℃，滴加二氯亚砜13L。

b1.加入D型的Arg.HCl 21.5kg，关闭冰盐水，自然升温至室温反应24小时。

c1.升温至35℃反应，TLC点板跟踪反应情况，反应大约48h结束。

d1.浓缩：反应结束后，减压浓缩得到油状物的L-精氨酸甲酯二盐酸盐中间体。

应用^[2]

L-精氨酸甲酯二盐酸盐可用于制备精氨酸衍生物Fmoc-Arg(Pbf)-OH的方法如下：

(1)引入Boc基团

a2.在300L反应釜内加入150L水，再加入碳酸氢钠25.2kg，搅拌；

逐渐加入L-精氨酸甲酯二盐酸盐油状物；加入四氢呋喃30L；分批加入(Boc)₂O，26.2kg搅拌，室温反应；

TLC法点板跟踪反应情况，当Arg·Oet·2HCl反应完即开始处理。

b2.酸化：反应完成后调节pH 3-4，用石油醚/乙酸乙酯(50L:25L)，萃取；

c2.加盐饱和，回调PH 6-7，用乙酸乙酯提产品，用饱和食盐水洗涤有机相。

d2.干燥：向有机相(带产品的乙酸乙酯溶液中)中加入60kg的无水硫酸钠，干燥8小时。

e2.提纯浓缩：抽滤掉硫酸钠固体，减压蒸馏乙酸乙酯相。浓缩后得到的Boc-ArgOet.HCl 油状物。

(2)引入Pbf

a3.在300L反应釜中加入步骤2得到的Boc-ArgOet.HCl，Pbf-Cl 31.9kg，丙酮200L，碳酸钾41.7kg，搅拌，加少量水，维持温度40-45℃，用TLC监测反应，待Boc-ArgOet.HCl完全反应进行抽滤，

b3.抽滤，除去固体不溶物，减压蒸馏丙酮，浓缩后的得到Boc-Arg(Pbf)Oet油状物待用。

(3)脱Boc

a4.在干燥的300L反应釜中，加入3N HCl/乙酸乙酯溶液120L，搅拌下加入Boc-Arg(Pbf) Oet油状物，维持温度10-15℃，室温搅拌。

b4.脱Boc完成后，加水洗涤，将产品洗至水相，加适量碳酸钠调节水相pH7。

(4)皂化

a5.将步骤(4)所得水相加95％乙醇100L，搅拌，滴加10N NaOH水溶液调节pH 11-12 进行皂化。

b5.皂化反应结束后，用6NHCl调节反应液的pH值至7，降温至-10-0℃冷冻结晶；离心，固体用乙酸乙酯搅洗一次，离心甩干收集固体；重结晶得到H-Arg(Pbf)OH固体。

(5)Fmoc-Arg(Pbf)-OH合成

a6.在反应釜中加入H-Arg(Pbf)-OH，水120L、THF，用Na₂CO₃调节PH＝8.5。

b6.逐渐加入Fmoc-Osu(芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺)，控制温度15-20℃，PH＝8-9以把Arg(Pbf) 反应完，尽量避免Fmoc-Osu过量。

TLC点板跟踪反应情况，从加完Fmoc-Osu开始计算，反应时间6小时。

c6.纯化：用石油醚/乙酸乙酯(2:1)萃取；水相用HCl酸化至pH＝3，搅拌2小时。酸化温度0-10℃；加乙酸乙酯萃取产品；用饱和食盐水洗至pH达到6；无水硫酸钠干燥，真空抽滤除去固体，滤液浓缩，减压浓缩得到固体，真空干燥得到产品。

产品纯度99.6％，单杂0.09％，L型异构体0.15％。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201710305099.X Fmoc?Arg（Pbf）?OH的合成方法【公开】/Fmoc-Arg（Pbf）-OH的合成方法【授权】