丙二醛(MDA)试剂盒的应用

背景^[1-3]

丙二醛(MDA)试剂盒可以定量检测血清、血浆、组织、细胞等样品中的丙二醛(MDA)含量。

原理：机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。

因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。

因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度，通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。

应用^[4][5]

用于针灸对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠肝脏组织中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量影响的研究

采用S180荷瘤小鼠，一次性腹腔注射环磷酰胺（CXT），造成化疗药物性肝损伤的荷瘤小鼠模型，通过观察针灸后CXT化疗后荷瘤小鼠肝脏组织中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量的影响，探讨针灸改善CXT化疗后荷瘤小鼠肝脏损伤的作用机理。

方法选取健康7周龄，体重22±2g的雄性昆明种小鼠，，建立S180肉瘤移植模型，将称量后的荷瘤小鼠，根据体重随机分为4组，分别是荷瘤空白组、荷瘤模型组、荷瘤针刺组及荷瘤艾灸组4组。

将环磷酰胺（CXT）按照150mg/kg的剂量一次性为模型组、针刺组和艾灸组的S180荷瘤小鼠进行腹腔注射，空白组则注入同等剂量的0.9%生理盐水。根据药代动力学，4h后模型即成。造模成功后，荷瘤针刺组和荷瘤艾灸组分别取“大椎”、“膈俞”、“肾俞”、“足三里”给予针刺和艾灸治疗。

荷瘤空白组和荷瘤模型组陪同固定但不给予针刺和艾灸治疗，每天1次，持续5天。同时每天进行荷瘤小鼠割尾采血，检测荷瘤小鼠外周血白细胞的数量。治疗5天后处死荷瘤小鼠，取肝脏中1/3段大小的肝小叶一块,立刻置于4℃生理盐水中固定2小时，备用。用酶联免疫吸附试验（ELISA）观察肝脏组织中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）蛋白质含量的阳性表达。

采用SPSS19.0进行统计分析。

结果1.造模前与造模后各组荷瘤小鼠白细胞计数进行比较，荷瘤空白组造模前后没有差异（P＞0.05），荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组造模前后有显著性差异（P＜0.05），说明环磷酰胺化疗所致荷瘤小鼠骨髓抑制、白细胞减少模型复制成功。

2. 治疗5天后，荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组荷瘤小鼠外周血白细胞数量上升，荷瘤针刺组高于荷瘤空白组、荷瘤模型组，有显著差异（P﹤0.05）。荷瘤针刺组和荷瘤艾灸组相比无显著差异（P＞0.05）。但是荷瘤针刺组高于荷瘤艾灸组。

3. 对GSH表达含量的影响。与荷瘤空白组相比，荷瘤模型组荷瘤小鼠肝脏组织中蛋白质GSH表达含量下降明显（P﹤0.001）；与荷瘤模型组比，荷瘤针刺组和荷瘤艾灸组荷瘤小鼠肝脏组织中GSH的含量升高（P﹤0.001）；与荷瘤针刺组比，在GSH表达含量的方面，荷瘤艾灸组明显升高，但两组无统计学意义（P＞0.05）。

4.对MDA表达含量的影响。与荷瘤空白组相比，在MDA表达含量方面，荷瘤模型组明显升高（P﹤0.001）；与荷瘤模型组相比，荷瘤针刺组和荷瘤艾灸组荷瘤小鼠肝脏组织中MDA含量降低（P﹤0.05）；与荷瘤针刺组比，荷瘤针刺组较荷瘤艾灸组降低明显，但两组差异不显著（P＞0.05）。

参考文献

[1]Regulation of redox glutathione levels and gene transcription in lung inflammation:therapeutic approaches[J].Irfan Rahman,William MacNee.Free Radical Biology and Medicine.2000(9)

[2]Efficacy and safety of high-dose cisplatin and cyclophosphamide with glutathione protection in the treatment of bulky advanced epithelial ovarian cancer[J].Francesco Re,Silvia Bohm,Saro Oriana,Gian Battista Spatti,Franco Zunino.Cancer Chemotherapy and Pharmacology.1990(5)

[3]Evidence of oxygen radical injury in experimental otitis media.Parks R R,Huang C C,Haddad J.Laryngoscope.1994

[4]Oxidative stress and enzymatic antioxidant status in patients with nonalcoholic steatohepatitis.M Koruk,S Taysi,MC Savas,O Yilmaz,F Akcay,M Karakok.Annals of clinical and laboratory science.2004

[5]郑若楠.针灸对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠肝脏组织中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量影响的研究[D].河南中医学院,2014.