克罗拉滨的制备方法

背景及概述^[1]

克罗拉滨(Clofarabine)为核苷酸类似物，结合了氟达拉滨(Fludarabine)和克拉屈滨(Cladribine)的优点，既抑制DNA聚合酶，又抑制核糖核酸还原酶，是目前唯一适合用于治疗儿童白血病的药物，已有研究证明其治疗有效率非常高，两次常规化疗无应答的患者对该药的总反应率为31％；而且病人耐受性好，无不可预知的不良反应；具有潜在广谱抗肿瘤特性。同时，Clofarabine在复发或抵抗性急性髓细胞性白血病(AML)患儿中也显示出希望，FDA的肿瘤药咨询委员会已经要求在这部分患儿中进行进一步的研究，用于成人白血病和其他实体瘤的治疗也正在研究中。由于在临床实验中的显著疗效，尤其是作为个特别适合用于儿童白血病的治疗药物，克罗拉滨在医药学方面具有重大的意义。2004年12月28日，美国FDA通过快速通道批准clofarabine用于治疗儿童急性粒细胞性白血病(ALL)，也证明了其潜在的巨大临床价值。

制备^[1-2]

报道一、

一种克罗拉滨原料药的制备方法，包括以下步骤：

(1)反应釜中加入1-氧-乙酰基-2，3，5-三-氧-苯甲酰基-β-D-核糖和二氯甲烷，通溴化氢气体反应，加水搅拌，取有机相用无水硫酸镁干燥，回收溶剂；加入正己烷，过滤，干燥得到1，3，5-3-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖固体；

(2)1，3，5-3-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖中加入二氯甲烷，搅拌冷却到-10℃，滴加磺酰氯，加入咪唑，搅拌；加入水搅拌0.5小时，分取有机相，采用无水硫酸钠干燥后，回收溶剂得到淡黄色粘稠物，加入热甲醇，搅拌溶解，冷却至室温，过滤，得到2-氧-咪唑磺酰基-1，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖固体；

(3)2-氧-咪唑磺酰基-1，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖中加入乙酸乙酯和Et3N*3HF，搅拌溶解后，升温到60℃，搅拌2小时，继续升温到70℃，搅拌2小时，待冷却到室温后，用水洗涤，过滤，干燥得到2-去氧-2-氟-1，3，5-三-氧-苯甲酰-α-D-阿拉伯呋喃糖固体；

(4)2-去氧-2-氟-1，3，5-三-氧-苯甲酰-α-D-阿拉伯呋喃糖中加入二氯甲烷和溴化氢饱和醋酸溶液，密闭，置室温搅拌24小时，分次倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，搅拌10分钟，静止后分取有机相，用饱和碳酸氢钠水洗涤，用无水硫酸钠干燥，回收溶剂，得到1-α-溴-2-去氧-2-氟-3，5-二-氧-苯甲酰-α-D-阿拉伯呋喃糖油状物；

(5)反应釜中加入叔丁醇、乙腈和2-氯腺嘌呤，氮气保护下，加入叔丁醇钾和钙氢，室温下搅拌30分钟；将1-α-溴-2-去氧-2-氟-3，5-二-氧-苯甲酰-α-D-阿拉伯呋喃糖溶解在叔丁醇和乙腈溶液中，滴加到反应釜中，于40℃搅拌5小时；冷却到室温后，搅拌加入二氯甲烷，减压抽滤，在硅胶上柱层析，收集冼脱液，浓缩蒸干得到2-氯-9-(3’，5’-二-氧-苯甲酰-2’-去氧-2’-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)腺嘌呤固体；

(6)2-氯-9-(3’，5’-二-氧-苯甲酰-2’-去氧-2’-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)腺嘌呤中加入甲醇，室温搅拌，加入甲醇钠甲醇溶液，于30℃下搅拌1小时；用醋酸中和，抽滤得到白色固体，用甲醇洗涤后，干燥得到克罗拉滨原料药粗品。

报道二、

步骤1化合物(3)的制备：1，3，5-三-氧-苯甲酰基核糖(3)的合成

在1L反应瓶中加入500mL二氯甲烷和9.7mL甲醇，冰水浴冷却至0～5℃，搅拌下小心加入17.8mL乙酰溴，在0℃搅拌反应10分钟，加入100.9克(1)，保持温度在0℃～5℃反应约2小时，反应完后加入200mL水，室温下搅拌1小时，分出有机层，水层以二氯甲烷(2×200mL)提取，合并有机层，以硫酸镁干燥约半小时，过滤，浓缩至约300mL，冰水浴冷却至0℃，搅拌下加入600mL正庚烷，析出白色固体，在0℃继续搅拌2小时，过滤，晶体以3×50mL正庚烷/二氯甲烷(2/1)洗涤，立即将晶体转入烧杯，放入真空干燥器抽干。得白色粉末(2)42g，收率45％。

步骤2化合物(4)的制备：2-脱氧-2-氟-1，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖(4)的合成

在500mL反应瓶中加入13.9g(2)和200mL二氯甲烷，搅拌下加入14.5gDAST，加热至40～42℃搅拌反应约18小时，冷却至室温，加入饱和NaHCO3溶液200mL，搅拌约30分钟，移入分液漏斗，分出有机相，再依次用水(2×200mL)洗涤有机相，以硫酸镁干燥约半小时，过滤，减压蒸干溶剂，残余物以100ml无水乙醇重结晶。得白色粉末(4)9.2g，收率66％。32g化合物(3)(195mmol)加入350ml的DMF(无水处理)中，冰水浴下加入28克氢化钠，搅拌半小时，滴加97ml的2，4-二氯氯苄，在35℃，反应4小时，反应完后到入2500ml冰水中，有大量固体析出，到去上面的水层，固体用无水乙醇泡洗，过滤，二氯甲烷溶解，用盐水洗，有机层无水硫酸镁干燥，过滤浓干，用乙酸乙酯∶石油醚＝8∶1重结晶的白色固体77g化合物(4)，产率为94％。

步骤3化合物(5)的制备：1-溴-2-脱氧-2-氟-3，5-二-氧-苯甲酰基-α-D-呋喃核糖(5)的合成

在250mL反应瓶中加入13.8g(4)和70mL二氯甲烷，室温搅拌下加入17.5mL溴化氢醋酸溶液(33％)，室温搅拌反应约18小时，依次用水(2×200mL)、饱和NaHCO3溶液200mL洗涤有机相，以硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂，得油状物(4)12.4g，收率99％

步骤4化合物(7)的制备：2-氯腺嘌呤(7)的合成

在500mL三口反应瓶中加入20.0g2，6-二氯嘌呤和200mL甲酰胺，室温搅拌下通入氨气，升温至75℃，反应液变稀，继续通入氨气，迅速澄清，升温至100℃，有黄色固体析出。继续搅拌反应6小时，冷却至室温，过滤，滤饼用少许甲酰胺洗涤2次，滤饼用1MNaOH水溶液(400mL)溶解，搅拌10分钟，过滤，滤饼用1MNaOH水溶液洗涤，合并滤液和洗液，以醋酸调至中性，析出固体，过滤，滤饼用水、乙醇洗涤，烘干，得黄色粉末(7)15.3克。收率85％。

步骤5化合物(8)的制备：6-氨基-2-氯-9-(2’-脱氧-2’-氟-3’，5’-二-氧-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-9H-嘌呤(8)的合成

在250mL反应瓶中加入(7)4.5g、37.6mL乙腈、18.8mL叔戊醇、18.8mL二氯甲烷和0.93g氢化钙，加热至50℃，搅拌反应10分钟，加入2.6g叔丁醇钾，搅拌反应20分钟，加入9.4g(5)溶于少许二氯甲烷的溶液，50℃下搅拌反应11小时，过滤，滤液以少许硅胶吸附，减压蒸干溶剂，以石油醚/乙酸乙酯：1/1进行柱层析，得白色粉末(8)4克。收率35％。

步骤6化合物(1)的制备：6-氨基-2-氯-9-(2’-脱氧-2’-氟-β-D-呋喃核糖)-9H-嘌呤(1，克罗拉滨)的合成

在50mL反应瓶中加入1.7g(8)、13.6mL甲醇，室温下搅拌溶解，加入0.068g甲醇钠，室温搅拌反应4小时，滴加冰醋酸至中性，冷却至-18℃，有大量白色固体析出，过滤，固体以少许-15℃的甲醇洗涤，再加入12毫升甲醇，加热至63℃溶解，冷却，析出白色晶体，过滤，烘干，得白色晶体0.376克，纯度99.6％，母液蒸干，得白色固体0.64克，收率35％，纯度99.4％。

参考文献

[1][中国发明,中国发明授权]CN200810026740.7一种克罗拉滨原料药的制备方法

[2][中国发明]CN200810023321.8一种核苷酸类似物克罗拉滨的合成方法