(2E)-N-[4-(1-苯甲酰基-4-哌啶基)丁基]-3-(3-吡啶基)-2-丙烯酰胺的生物活性研究

发布日期:2020/10/12 11:04:04

背景及概述^[1]

(2E)-N-[4-(1-苯甲酰基-4-哌啶基)丁基]-3-(3-吡啶基)-2-丙烯酰胺的研发代号为FK866，是一种烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂(nMPRTase抑制剂)，IC50值为0.09nM。

生物活性研究^[1-3]

侵袭、转移是肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)最主要的特征,而上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)在HCC的侵袭、转移过程扮演重要角色。因此,寻找抑制EMT的靶向药物成为目前研究的热点。目前研究发现小分子药物烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl transferase,NAMPT)抑制剂——(2E)-N-[4-(1-苯甲酰基-4-哌啶基)丁基]-3-(3-吡啶基)-2-丙烯酰胺（FK866）可抑制肝癌细胞的活性,但其在肝癌中是否能抑制EMT过程,从而抑制肝癌细胞的侵袭和转移及可能的机制目前尚不清楚。济南大学张斌通过小分子靶向药物FK866处理肝癌MHCC97-H细胞,观察细胞功能的变化,探讨FK866对人肝癌MHCC97-H细胞活性、EMT过程的影响及可能作用的机制。方法:将人肝癌MHCC97-H细胞在体外用不同浓度FK866处理后,分为对照组和实验组。通过CCK8实验,观察FK866处理细胞24h、48h、72h后细胞活性的变化情况;检测FK866处理MHCC97-H细胞后NAD~+、ATP含量变化;通过划痕愈合实验、Transwell小室实验分别观察MHCC97-H细胞经FK866处理后细胞迁移、侵袭能力的变化情况;然后通过Western blot实验检测FK866处理MHCC97-H细胞后细胞SIRT1及EMT标志蛋白Vimentin、E-Cadherin的表达情况。结果:CCK8细胞活性实验检测结果显示FK866呈浓度依赖性抑制肝癌MHCC97-H细胞活性(P<0.05);NAD~+、ATP含量检测结果显示,FK866呈浓度依赖性降低MHCC97-H细胞的NAD~+、ATP含量(P<0.05);细胞划痕愈合实验、Transwell小室迁移和侵袭实验结果表明,FK866呈浓度依赖性地抑制肝癌MHCC97-H细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);Western blot实验检测SIRT1和EMT标志蛋白(Vimentin、E-Cadherin)的表达情况,结果显示FK866能显著降低SIRT1、Vimentin的表达,上调E-Cadherin的表达(P<0.05)。结论:1.FK866可以抑制肝癌MHCC97-H细胞的活性,降低细胞内NAD~+、ATP的含量。2.FK866能够抑制肝癌MHCC97-H细胞迁移、侵袭能力。3.FK866通过抑制NAMPT/NAD~+/SIRT1通路,上调E-Cadherin,下调Vimentin,逆转肝癌细胞EMT进程进而抑制肝癌细胞侵袭和转移。

李清梅等人观察了FK866对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤肺组织及炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β的影响,探讨FK866对急性肺损伤的影响。方法：将成年雄性健康清洁级SD大鼠50只随机分为5组,每组10只,分别为生理盐水(NS)对照组NS+NS(A组)、单纯给药组NS+FK866(B组)、急性肺损伤模型组LPS+NS(C组)、药物干预组LPS+FK866(D组)及溶媒对照组LPS+二甲基亚砜(E组)。采用尾静脉注射LPS的方式建立大鼠急性肺损伤模型,给药6 h后观察大鼠的一般情况,检测大鼠肺组织中TNF-α和IL-1β的水平及肺组织病理切片的变化。结果：与C组比较,D组大鼠肺组织损伤明显减轻,同时肺组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低。结论：FK866对内毒素急性肺损伤大鼠具有一定的肺保护作用。

蒋师放等人探讨了FK866在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠急性肝损伤(acute liver injury,ALI)中的保护作用及机制。方法:24只6周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、FK866组、APAP组、FK866加APAP组。通过比色法检测血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酸(aspartate aminotransferase,AST)活性;HE染色观察肝组织病理学变化;酶联免疫法检测血清中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;Western blot检测尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl-tiansferase,NAMPT)的蛋白表达水平。结果:FK866加APAP组中,ALT和AST分别为(13.969±0.290)、(7.150±0.669)IU/L,较APAP组明显降低(ALT:F=364.709,P=0.000;AST:F=130.398,P=0.000),可见肝脏组织小叶结构较清晰,细胞变性轻微,无明显淤血;炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α检测值分别为(176.333±0.775)、(79.765±1.000)、(147.083±1.000)pg/mL,较APAP组含量明显减少(IL-6:F=207.106,P=0.000;IL-1β:F=165.027,P=0.000;TNF-α:F=118.636,P=0.000);NAMPT蛋白表达水平较APAP组下调。结论:FK866在APAP诱导的ALI中对肝脏具有保护作用,其机制可能与抗炎效应相关。