ANTI-BDNF POLYCLONAL ANTIBODY的应用

背景^[1-3]

ANTI-BDNF POLYCLONAL ANTIBODY是一类可以特异性结合BDNF的多克隆抗体，主要用于检测BDNF的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

脑源性神经营养因bai子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)是在脑内合成的一du种蛋白质，它广泛分布zhi于中枢神经系统内，在中枢神经系统发育过dao程中，对神经元的存活、分化、生长发育起重要作用,并能防止神经元受损伤死亡、改善神经元的病理状态、促进受损伤神经元再生及分化等生物效应，而且也是成熟的中枢及周围神经系统的神经元维持生存及正常生理功能所必需。

BDNF是体内含量最多的神经营养因子，它通过与TrkB（酪氨酸激酶B）的结合而发挥作用。TrkB的胞内区域具有内在的酪氨酸激酶活性，BDNF与TrkB结合后激活胞内区域，引起TrkB自身磷酸化作用增强，进而激活Ras-MAPK通路，最后在CAMP反应元件结合蛋白(CREB)的丝氨酸位点激活CREB。

CREB通过增加BDNF基因及抗凋亡蛋白基因BCL-2的表达，来促进神经细胞生存，增加突触可塑性及神经发生。作用方式具体如下：(1)增加突触可塑性，进而影响长时程增强(long-term-ptentiati，nLTP)，后者是学习过程和记忆形成(第二级记忆)过程的基础。(2)促进神经发生尤其是海马的神经发生，BDNF基因敲除的杂合子小鼠，其神经病变的发生比野生型小鼠减少许多。(3)促进细胞生存的作用，主要体现在对各种神经元，尤其是对5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)能神经元的发育分化与生长再生具有维持和促进作用。

应用^[4][5]

用于脑源性神经营养因子（BDNF）、降钙素基因相关肽（CGRP）在功能性消化不良（FD）患者中的表达及其临床价值研究

研究方法1.选取符合罗马Ⅲ诊断标准的50名功能性消化不良患者作为实验组,并根据其临床特点分出亚型,其中PDS组23名患者,EPS组11名患者,PDS重叠EPS组16名患者。对照组选择没有功能性消化不良症状的且来我院体检中心体检未发现异常者。

2. 实验组及对照组的所有受试人群均采用汉密尔顿焦虑/抑郁量表(HAMM/HAMD)进行测评,并比较FD人群和健康对照人群的焦虑、抑郁状况,同时探索焦虑、抑郁在FD不同亚型患者之间有无差异。

3. 用酶联免疫吸附法(ELISA)检测实验组及健康对照组受试人群外周血清中BDNF、CGRP的浓度,比较各个不同亚型FD患者与对照组血清中BDNF、CGRP的浓度有无差异,比较FD不同亚型之间血清中BNDF、CGRP的浓度有无差异,及其与焦虑、抑郁之间的关联。

4. 用免疫组织化学方法检测BDNF、CGRP在胃黏膜组织中的表达情况,采用Image-Proplus 6.0软件计算表示细胞染色强度的平均光密度值(OD值)。在选定的面积内,平均光密度值(OD值)越大,表示BDNF、CGRP表达越强。比较不同亚型FD患者胃黏膜中BDNF、CGRP的水平与对照组有无差异,比较FD不同亚型之间胃黏膜中BNDF、CGRP的水平有无差异,及其与焦虑、抑郁之间的关联。

5.比较FD患者胃黏膜组织中的BDNF变化与血清中BDNF的变化是否一致。6.数据统计学处理釆用SPSS16.0软件,数据均采用χ±S表示。成组设计两样本均数的比较采用t检验;计数资料采用卡方检验;多组样本均数的比较经方差齐性检验后采用单因素方差分析(one-way ANOVA);两变量之间相关分析采用Pearson相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。

参考文献

[1]Rome III Functional Constipation and Irritable Bowel Syndrome With Constipation Are Similar Disorders Within a Spectrum of Sensitization,Regulated by Serotonin[J].Chander Shekhar,Phillip J.Monaghan,Julie Morris,Basma Issa,Peter J.Whorwell,Brian Keevil,Lesley A.Houghton.Gastroenterology.2013(4)

[2]Developmental origins of Functional Dyspepsia-like gastric hypersensitivity in rats[J].John H.Winston,Sushil K.Sarna.Gastroenterology.2012

[3]BDNF as a pain modulator[J].Adalberto Merighi,Chiara Salio,Alessia Ghirri,Laura Lossi,Francesco Ferrini,Chiara Betelli,Rita Bardoni.Progress in Neurobiology.2008(3)

[4]Effects of paroxetine or milnacipran on serum brain-derived neurotrophic factor in depressed patients[J].Reiji Yoshimura,Masae Mitoma,Atsuko Sugita,Hikaru Hori,Tatsuya Okamoto,Wakako Umene,Nobuhisa Ueda,Jun Nakamura.Progress in Neuropsychopharmacology&Biological Psychiatry.2007(5)

[5]张旭.脑源性神经营养因子（BDNF）、降钙素基因相关肽（CGRP）在功能性消化不良（FD）患者中的表达及其临床价值[D].安徽医科大学,2015.