小鼠抗GFAP单克隆抗体的应用

背景^[1-3]

小鼠抗GFAP单克隆抗体是以GFAP为抗原的小鼠单克隆抗体，可以特异性结合GFAP。小鼠抗GFAP单克隆抗体主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等GFAP检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

GFAP是胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein）的英文简称，是星形胶质细胞活化的标志物。胶质纤维酸性蛋白。神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)是一种Ⅲ型中间丝状蛋白，以单体形式存在。

在人类当中发现有8种同源异构体，相对分子质量介于(40-53)×10^3。人类GFAP基因定位于17号染色体长臂2区1带上，由9个外显子和8个内含子组成。

GFAP主要分布于中枢神经系统的星形胶质细胞，参与细胞骨架的构成并维持其张力强度。其在软骨细胞、成纤维细胞、肌上皮细胞、淋巴细胞、肝星形细胞也有表达。但外周系统所表达的GFAP不能被中枢神经系统的GFAP单克隆抗体检测出，提示两个来源的GFAP可能在结构上存在差异。GFAP或许对神经系统有特异性。

GFAP见于神经系统以外疾病：免疫组化研究发现：在正常乳腺和乳腺的良性病变组织中，有部分MEC表达GFAP。乳腺原位癌中残存的MEC不表达GFAP。在乳腺原位癌和浸润性癌中，各种癌细胞均不表达GFAP。在乳腺的各种良性病变中，部分EC和间质的肌纤维母细胞可表达GFAP。但在乳腺癌的间质中，即使间质纤维化很严重，肌纤维母细胞也不表达GFAP，而表达SMA。

应用^[4][5]

用于小鼠抑郁症模型建立及干预、行为学和海马GFAP变化研究

建立小鼠抑郁症模型,研究其行为学变化,了解其大脑中GFAP(glial fibrillary acidic protein)的变化,并给予药物干预,探索抑郁症模型是否与觅食行为有关,以及觅食行为是否与GFAP相关,和觅食行为所涉及的机制,为抑郁症的临床治疗及深入的基础研究奠定基础。

方法1.建立小鼠抑郁症模型：根据Molina的方法并加以改进,即慢性轻度不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型,评价其有效性。在觅食行为试验中,抑郁症模型的觅食量改变。

2. 检测GFAP:利用Western blot和RT-PCR的方法检测抑郁模型海马和皮层内GFAP的表达。免疫组化检测GFAP在海马中各区域的表达。

3. 药物干预：建立小鼠抑郁症模型,随机将其分为三组,分别给予腹腔注射不同的药物干预14d后,观察其行为学和GFAP表达量的改变,探讨抑郁症的发生机制。

结果1.在行为学实验中CUMS抑郁症模型小鼠行为学指标与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05)。在觅食实验中,模型组觅食活动与对照组相比显著减少差异有统计学意义(p<0.05)。

2.GFAP蛋白和mRNA表达水平,GFAP在模型组小鼠海马中的表达与对照组相比减少差异有统计学意义(p<0.05),在模型组小鼠皮层中没有变化。

参考文献

[1]Exercise Intervention May Prevent Depression[J].S.-B.He,W.-G.Tang,W.-J.Tang,X.-L.Kao,C.-G.Zhang,X.-T.Wong.Int J Sports Med.2012(07)

[2]Chronic exposure to an extremely low‐frequency magnetic field induces depression‐like behavior and corticosterone secretion without enhancement of the hypothalamic–pituitary–adrenal axis in mice[J].Kazuyoshi Kitaoka,Mitsuo Kitamura,Shun Aoi,Noriyuki Shimizu,Kazuo Yoshizaki.Bioelectromagnetics.2012(1)

[3]The antidepressant-like action of a simple selenium-containing molecule,methyl phenyl selenide,in mice[J].Carla Elena Sartori Oliveira,Bibiana Mozzaquatro Gai,Benhur Godoi,Gilson Zeni,Cristina Wayne Nogueira.European Journal of Pharmacology.2012(1-3)

[4]Sex-specific and region-specific changes in BDNF–TrkB signalling in the hippocampus of 5-HT1A receptor and BDNF single and double mutant mice[J].YeeWen Candace Wu,Rachel A.Hill,Maren Klug,Maarten van den Buuse.Brain Research.2012

[5]杨春蕊.小鼠抑郁症模型建立及干预、行为学和海马GFAP变化研究[D].昆明医科大学,2013.