小鼠抗C-MYC抗体的应用

背景^[1-3]

小鼠抗C-MYC抗体是以C-MYC为抗原的HRP山羊多克隆抗体，可以特异性结合C-MYC。小鼠抗C-MYC抗体主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等C-MYC检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

c-myc基因是myc基因家族的重要成员之一，c-myc基因既是一种可易位基因，又是一种多种物质调节的可调节基因，也是一种可使细胞无限增殖，获永生化功能，促进细胞分裂的基因，myc基因参于细胞凋零，c-myc基因与多种肿瘤发生发展有关。

C-myc基因的产物为62KD的磷酸化蛋白P62c-mgc，是由C-myc基因的外显子2和3共同编码的由439个氨基酸组成的蛋白质，定位细胞核内，为核蛋白，依C-one编码产物，功能分类，C-myc癌基因属核蛋白基因，具有转化细胞的能力，并具有与染色体、DNA结合的特性，在调节细胞生长、分化及恶性转化中发挥作用。

C-Myc蛋白在结构上可分为转录激活区，非特异DNA结合区，核靶序列，碱性区，螺旋一环一螺旋(HLH)及亮氨酸拉链区，在已知的转录因子中可介导蛋白的寡聚化，这两个区同时存在是C-myc蛋白所特有的，在其它蛋白质中，很少发现。在C-Myc蛋白中，螺旋一环一螺旋紧随着碱性区，揭示其以特异性序列方式和DNA相互作用。

在以原核生物为实验对象的研究表明，该碱性区以一个自由环存在，当以特殊方式结合到DNA上时，则变成螺旋，该区是C-Myc蛋白与DNA特异序列的结合部位。

应用^[4][5]

用于褪黑素对小鼠胃癌c-Myc,p53表达的影响研究

通过荷胃癌小鼠模型研究褪黑素对癌基因c-Myc和抑癌基因p53表达的影响，探讨褪黑素抑制肿瘤的一些可能机制。

方法1.建立小鼠前胃癌细胞株MFC褪黑素干预模型：MFC细胞传代培养后，按不同浓度褪黑素干预不同时间分组，分别为：0mM、2mM、4mM、6mM、8mM组（24h）；0mM、2mM、4mM、6mM组（48h）；0mM、2mM、4mM组（72h）。观察细胞形态变化，并进行后续研究。

2. 建立荷胃癌小鼠模型：选用615近交系小鼠，MFC细胞计数后，按5×105个细胞/小鼠，右腋皮下注射，一周后，荷瘤模型建立成功，给予不同浓度褪黑素干预一周：A、荷瘤空白对照组：荷瘤成功后每天腹腔注射生理盐水100mg/kg；B、褪黑素低剂量组（25mg/kg）；C、MLT中剂量组（50mg/kg）；D、MLT高剂量组（100mg/kg）。

3. 应用免疫细胞化学染色方法定位细胞c-Myc和p53蛋白的表达。

4. 应用实时荧光定量PCR比较分析褪黑素干预后各组细胞及肿瘤组织中c-Myc和p53mRNA表达量的变化。

5.应用蛋白免疫印迹（Western bolt）技术和图像分析软件分析褪黑素干预后各组细胞及肿瘤组织中c-Myc和p53蛋白表达量的变化。6.应用免疫组织化学方法定量检测肿瘤组织中c-Myc和p53蛋白表达量的变化。

参考文献

[1]Immunohistochemical assessment of apoptosis-associated proteins:p53,Bcl-xL,Bax and Bak in gastric cancer cells in correlation with clinical and pathomorphological factors[J].M Gryko,A Pryczynicz,K Guzińska-Ustymowicz,Z Kamocki,K Zar?ba,A Kemona,B K?dra.Advances in Medical Sciences.2012(1)

[2]CIP2A overexpression is associated with c-Myc expression in colorectal cancer[J].Camilla B?ckelman,Selja Koskensalo,Jaana Hagstr?m,Mikael Lundin,Ari Ristim?ki,Caj Haglund.Cancer Biology&Therapy.2012(5)

[3]Epidemiology of Helicobacter pylori infection and Public Health Implications[J].Alexander C.Ford,Anthony T.R.Axon.Helicobacter.2010

[4]Helicobacter pylori infection,oncogenic pathways and epigenetic mechanisms in gastric carcinogenesis[J].Song-Ze Ding,Joanna B Goldberg,Masanori Hatakeyama.Future Oncol..2010(5)

[5]宫喜.褪黑素对小鼠胃癌c-Myc,p53表达的影响[D].福建医科大学,2012.