N-CBZ-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-D]嘧啶的应用举例

背景及概述^[1]

N-CBZ-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-D]嘧啶是一种医药中间体，可用于制备化合物1-(2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，该化合物是一种KRAS G12C抑制剂。KRas充当在非活性(GDP结合型)和活性(GTP结合型)状态之间循环的分子开关，以将从多种酪氨酸激酶接收的上游细胞信号转导至下游效应物来调节多种过程，包括细胞增殖。

应用^[1]

N-CBZ-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-D]嘧啶用于制备1-(2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的方法如下：

步骤A：4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.715g，3.10mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(3ml)中的溶液在搅拌下在冰浴上冷却并分小份添加N-CBZ-2,4-二氯-5,6,7,8-四氢吡啶[3,4-D]嘧啶(1.00g，2.96mmol)添加，然后是DIPEA(0.57mL，3.25mmol，1.1eq.)。使所生成的溶液经1小时升温至室温，然后在水(15mL)和MTBE(50mL)之间分配。有机层用水(2x10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发，产生黄色固体(1.54g，98％)。ES+APCI MS m/z 532.3，[M+H]+。

步骤B：4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将粗4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(500mg，0.940mmol)、(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(216mg，1.88mmol)、Cs₂CO₃(612mg，1.88mmol)和二噁烷(0.5mL)的混合物氮气用冲洗。将小瓶加盖并在120℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却，在EtOAc(20mL)和水(10mL)之间分配，有机层用水和盐水(各5mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空蒸发。将化合物通过硅胶色谱法，Redisep 40g，用4至10％MeOH/DCM+0.2％NH₄OH洗脱进行纯化，产生黄色固体(197mg，34％)。ES+APCI MS m/z 611.4[M+H]+。

步骤C：2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(197mg，0.323mmol)、甲醇(10mL)和钯碳(10mg，5％，Degussa型E101 NO/W)的混合物脱气并在氢气氛(气囊)下搅拌1小时。将反应混合物通过硅藻土(2mL)过滤，用MeOH(3x3mL)洗涤，真空蒸发，并通过在真空和高真空下用甲苯蒸发进行干燥，产生无色固体(150mg，98％)。ES+APCI MS m/z 477.2[M+H]+。

步骤D：2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并-[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.315mmol)，Cs₂CO₃(308mg，0.944mmol)、二噁烷(1mL)、1-碘萘(0.0689ml，0.472mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(26.3mg，0.0315mmol)(RuPhos-Pd-G3)的混合物用氮气吹扫，将烧瓶加盖并在70℃下搅拌过夜。冷却反应混合物，在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配，有机层用水和盐水(各5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将化合物通过硅胶色谱法，Redisep 40g，使用4至10％MeOH+0.5％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生无色固体，131mg。ES+APCI MS m/z 603.3[M+H]+。

步骤E：1-(2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(130mg，0.2157mmol)溶于1M三氟乙酸的DCM溶液中，并让所生成的溶液保持在室温下一小时。将反应混合物在2M Na₂CO₃(5mL)和DCM(15mL)之间分配，并将有机层真空蒸发。固体残余物溶于DCM(5mL)中，在冰-EtOH-CO₂浴上在搅拌下冷却到-30℃，添加三乙胺(0.09ml，0.64mmol)，然后是丙烯酰氯(0.035ml，0.43mmol)。在-30℃下1min后，用NH₄OH(0.05mL)淬灭反应混合物，真空蒸发并在高真空下干燥。残余物溶于DCM(5mL)中，通过棉塞过滤，并通过硅胶色谱法，Redisep 40g，用5至10％MeOH/DCM+0.25％NH₄OH洗脱进行纯化，产生无色固体(19.6mg，16％)。ES+APCI MS m/z557.3，[M+H]+.

参考文献

[1] [中国发明] CN201780044670.5 KRAS G12C抑制剂