HRP标记的山羊抗兔IGG的应用

背景^[1-3]

HRP标记的山羊抗兔IGG是以兔IGG为抗原的HRP山羊多克隆抗体，可以特异性结合兔IGG。HRP标记的山羊抗兔IGG主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等兔IGG检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

抗原抗体反应可分为两个阶段：阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应；

第二阶段为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在适当温度、pH、电解质和补体影响下，出现沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合介导的肉眼可见的反应，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。在血清学反应中，以上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等）的影响。

免疫球蛋白baiG（IgG）是血清中免疫球du蛋白主成分，约占血清zhi中免疫球蛋白总含量的75%，正常dao值为9.5~12.5mg/ml。其中40～50%分布于血清中，其余分布在组织中。分子量约为150000道尔顿。人类血清中的IgG主要为单体，正常人的IgG包括四个亚型，其IgG1占60～70%，IgG2占15～20%，IgG3占5～10%，IgG4占1～7%。这些亚型在补体激活的经典途中结合能力各不相同。

应用^[4][5]

用于基于量子点发光技术改进的流式细胞术在分子检测领域的应用研究

分子检测是一类常见的检测方法,检测样本包括DNA、RNA、蛋白质等小分子物质,根据检测样本类型将这一类检测统称为分子检测,在临床上又将这一部分检测内容称为分子诊断。

针对DNA、RNA类核酸样本的检测,常见的技术包括:PCR、DNA测序技术、荧光原位杂交技术(FISH),DNA杂交印记技术,基因芯片技术等,而在分子检测领域中则除了这部分内容还包含流式、免疫组化、ELISA等其他检测蛋白、抗体等小分子的方法。这其中流式细胞术因具有快速、高精度、高准确性、多参数和高通量等优点,是目前先进的细胞定量分析技术之一,也被广泛应用于分子检测领域。

首先以G5代PAMAM修饰羊抗兔IgG,形成一个纳米颗粒用于捕获跟担载相应的兔抗,另一边用水溶性硒化镉量子点修饰羊抗鼠IgG,用来捕获鼠抗并形成指示探针。在这个体系中只要加入相应的鼠抗跟兔抗,就会形成三明治夹心型的纳米复合物,这样就可以使得待测指标在流式中被检测出来。

与传统的CBA法相比,省去了复杂的试剂盒购买过程,只需要单独购买相应的鼠抗兔抗两种抗体即可完成待测指标的流式检测。此外PAMAM修饰的羊抗兔IgG与QDs修饰的羊抗鼠IgG这两部分也可以分开使用。如仅使用QDs修饰的羊抗鼠IgG,用于免疫组化,免疫细胞化学技术等方法。

参考文献

[1]Molecular networks underlying myofibroblast fate and fibrosis[J].April Stempien-Otero,Deok-Ho Kim,Jennifer Davis.Journal of Molecular and Cellular Cardiology.2016

[2]Threshold Dose of Three Types of Quantum Dots(QDs)Induces Oxidative Stress Triggers DNA Damage and Apoptosis in Mouse Fibroblast L929 Cells[J].Zhang,Ting,Wang,Yiqing,Kong,Lu,Xue,Yuying,Tang,Meng.International Journal of Environmental Research a.2015(10)

[3]Heat shock proteins in cancer:chaperones of tumorigenesis[J].Stuart K.Calderwood,Md Abdul Khaleque,Douglas B.Sawyer,Daniel R.Ciocca.Trends in Biochemical Sciences.2006(3)

[4]量子点荧光标记用于泌尿生殖系肿瘤组织标本特异性标志物检测的研究[D].余伟民.武汉大学2011

[5]刘杨.基于量子点发光技术改进的流式细胞术在分子检测领域的应用研究[D].吉林大学,2020.