ANTI-IL-12抗体的应用

背景^[1-3]

ANTI-IL-12抗体是一类可以特异性结合ANTI-IGE的多克隆抗体，主要用于检测ANTI-IGE的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中ANTI-IGE水平。用纯化的ANTI-IGE抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ANTI-IGE，再与HRP标记的ANTI-IGE抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ANTI-IGE呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中ANTI-IGE浓度。

白细胞介素-12是趋化因子家族的一种细胞因子，目前共发现了38个白细胞介素，分别命名为IL-1---IL38.功能复杂，成网络，复杂重叠。

白细胞介素(interleukin,IL)12,由抗原提呈细胞和B细胞产生，是一种异源二聚体形式的前炎症细胞因子，并以这种形式分泌到细胞外。IL-12能诱导IFN-γ产生，在体内免疫应答中（特别是在细菌或寄生虫感染中）它也是IFN-γ产生所必需。

来自活化淋巴细胞，由IL-12A(p35)和IL-12B(p40)亚基组成，二者分别与IL-6Rα链和IL-6同源。是NK细胞激活因子，能促进CD4+Th0细胞分化为Th1细胞，协同亚剂量IL-2，可诱导LAK细胞活性。

细胞来源：IL-12主要由b细胞和巨噬细胞产生；其分子是一种异型二聚体，40kd（p40）和35kd(p35)的2个亚基通过二硫键相连接。IL-12主要作用于t细胞和nk细胞，曾被命名为毒性淋巴细胞成熟因子（CLMF）和NK细胞刺激因子（NKSF）。

应用^[4][5]

用于康复新联合5-ASA对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4、IL-12表达的影响研究

观察康复新对大鼠结肠黏膜组织中IFN-γ、IL-4及IL-12表达的影响，探讨康复新、5-ASA及两者联合用药对治疗大鼠UC的疗效。

方法：按照随机原则，将50只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组，余40只大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-TNBS)造模法制备UC大鼠模型，4只大鼠于造模过程中死亡，剩余的36只大鼠再次按照随机原则分为4组，分别为模型组，5-ASA组，康复新组，康复新与5-ASA联合用药组，给予2,4,6-TNBS造成模后，正常对照组以及模型组大鼠分别给予生理盐水进行(1ml/200g体重)灌肠；5-ASA组：5-ASA以(1ml/200g体重)的量进行灌肠；

康复新组：以康复新液(1ml/200g体重)进行灌肠；康复新+5-ASA组：以5-ASA(1ml/200g体重)的量灌肠（上午8时）和以康复新(1ml/200g体重)的量灌肠（下午4时），每天给予灌肠1次，共7天。每天记录大鼠的一般情况，包括腹泻、便血及体重改变等情况，用药21天后，各组大鼠用2%戊巴比妥0.2ml/100g体重腹腔注射麻醉，腹正中切口，取血和结肠黏膜组织备用。

采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中IFN-γ、IL-4、IL-12的水平、采用免疫组织化学法检测大鼠结肠黏膜中IFN-γ、IL-4、IL-12的表达、实时荧光定量PCR（RT-PCR)检测结肠黏膜中IFN-γ、IL-4、IL-12mRNA的表达。

结果:与模型组相比，康复新、5-ASA、联合治疗组大鼠血清中IL-12、IFN-γ的表达降低(P<0.01)，IL-4的表达升高(P<0.01)；与康复新组和5-ASA组相比，联合治疗组大鼠血清中IL-12和IFN-γ的水平表达明显下降(P<0.01)，而IL-4的表达水平明显升高(P<0.01)。康复新组与5-ASA组比较无显著差异(P>0.05)。

参考文献

[1]Immune intervention with T regulatory cells:Past lessons and future perspectives for type 1 diabetes[J].Manuela Battaglia,Maria-Grazia Roncarolo.Seminars in Immunology.2011(3)

[2]Effect of acupuncture-moxibustion on the expression of IGF-1 and SOCS2 in colonic mucosa of rats with ulcerative colitis[J].Xiao-mei Wang,Xin Guan,Guang Ji,Zheng Shi,Huan-gan Wu.Journal of Acupuncture and Tuina Science.2010(4)

[3]Scorpion Venom and the Inflammatory Response[J].Vera L.Petricevich,Fulvio D’Acquisto.Mediators of Inflammation.2010

[4]Biologic targeting in the treatment of inflammatory bowel diseases[J].Sandro Ardizzone.Biologics:Targets and Therapy.2008(defa)

[5]郭艳娥.康复新联合5-ASA对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4、IL-12表达的影响[D].山西医科大学,2014.