ANTI-C-MYC抗体的应用

背景^[1-3]

ANTI-C-MYC抗体是一类可以特异性结合ANTI-C-MYC的多克隆抗体，主要用于检测ANTI-C-MYC的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中ANTI-C-MYC水平。用纯化的ANTI-C-MYC抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ANTI-C-MYC，再与HRP标记的ANTI-C-MYC抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ANTI-C-MYC呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中ANTI-C-MYC浓度。

c-myc基因是myc基因家族的重要成员之一，c-myc基因既是一种可易位基因，又是一种多种物质调节的可调节基因，也是一种可使细胞无限增殖，获永生化功能，促进细胞分裂的基因，myc基因参于细胞凋零，c-myc基因与多种肿瘤发生发展有关。

C-myc基因的产物为62KD的磷酸化蛋白P62c-mgc，是由C-myc基因的外显子2和3共同编码的由439个氨基酸组成的蛋白质，定位细胞核内，为核蛋白，依C-one编码产物，功能分类，C-myc癌基因属核蛋白基因，具有转化细胞的能力，并具有与染色体、DNA结合的特性，在调节细胞生长、分化及恶性转化中发挥作用。

C-Myc蛋白在结构上可分为转录激活区，非特异DNA结合区，核靶序列，碱性区，螺旋一环一螺旋(HLH)及亮氨酸拉链区，在已知的转录因子中可介导蛋白的寡聚化，这两个区同时存在是C-myc蛋白所特有的，在其它蛋白质中，很少发现。

在C-Myc蛋白中，螺旋一环一螺旋紧随着碱性区，揭示其以特异性序列方式和DNA相互作用。在以原核生物为实验对象的研究表明，该碱性区以一个自由环存在，当以特殊方式结合到DNA上时，则变成螺旋，该区是C-Myc蛋白与DNA特异序列的结合部位。

应用^[4][5]

用于MYC调节CHK1和CHK2引起鼻咽癌干细胞放射抵抗的机制研究

干细胞可以通过优先激活CHK1和CHK2的细胞周期检验点,增加DNA修复能力从而引起辐射耐受。c-MYC基因是MYC基因家族的重要成员之一,是一种可使细胞无限增殖,获永生化功能,促进细胞分裂的基因,因与多种肿瘤发生发展有关。

c-MYC基因的表达一般与细胞的生长状态有关,然而在细胞分化时c-MYC表达则降低,发现c-MYC在细胞GO期到S期的过程中也起作用。表明c-MYC表达的变化与细胞的增殖及分化状态有关,其表达产物在调节细胞生长、分化或恶性转化中发挥作用。

MYC可以通过抑制p27激活cyclin E/Cdk2使成纤维细胞静止。以往的研究还表明,MYC可以同时激活p53和pten引起正常的和恶性干/祖细胞的分化,自我更新,及致瘤性。

根据PKH26荧光染料的特性,识别具有慢周期特性的PKH26+细胞,通过明确c-MYC对CHK1/2.的直接调节作用,阐述PKH26+细胞具有辐射抗性的机制,旨在揭示c-MYC介导的DNA损伤修复在鼻咽癌放疗抵抗中的作用。

参考文献

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[3]Radio-modulatory effects of Green Tea Catechin EGCG on pBR322 plasmid DNA and murine splenocytes against gamma-radiation induced damage[J].Benila Richi,Raosaheb K.Kale,Ashu B Tiku.Mutation Research-Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis.2012(1)

[4]Tumor‐Initiating Label‐Retaining Cancer Cells in Human Gastrointestinal Cancers Undergo Asymmetric Cell Division[J].Hong‐WuXin,Danielle M.Hari,John E.Mullinax,Chenwi M.Ambe,TomotakeKoizumi,SatyajitRay,Andrew J.Anderson,Gordon W.Wiegand,Susan H.Garfield,Snorri S.Thorgeirsson,ItzhakAvital.STEM CELLS.2012(4)

[5]王雯珺.MYC调节CHK1和CHK2引起鼻咽癌干细胞放射抵抗的机制[D].南方医科大学,2013.