SUP-T1人T淋巴瘤细胞的应用

背景^[1-3]

SUP-T1人T淋巴瘤细胞系来源于一例8岁儿童T细胞淋巴母细胞淋巴瘤的恶性胸腔积液。

淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵”。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤(NK)细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。

皮肤T细胞淋巴瘤是全球范围内预后较差的肿瘤之一，早期即可有皮肤破溃及斑块形成，且易逐渐扩张和发展。最新研究显示恶性T细胞控制炎症环境，抑制细胞免疫和抗肿瘤反应，同时形成促进其自身扩张的慢性炎症微环境。

将T细胞淋巴瘤分为不同的病理亚型：T细胞、NK细胞淋巴瘤/白血病。大致分为两类：前T细胞肿瘤和胸腺后T细胞淋巴瘤，可原发于淋巴结、结外组织或皮肤。与侵袭性B细胞淋巴瘤相比，成熟或外周T细胞淋巴瘤的预后较差。

但间变性大细胞淋巴瘤（an⁃aplasticlargecelllymphoma，ALCL）采用蒽环类为基础的化疗方案，如CHOP方案，其有效率与DLBCL相似。起源于固有免疫系统的PTCL好发生于青少年，多为结外受累，好发部位为皮肤和黏膜，而起源于其他免疫系统的外周T细胞淋巴瘤（peripheralT-celllymphomas，PTCL）则好发于成年人，多为淋巴结受累，占PTCL的2/3以上。

应用^[4][5]

用于Notch1基因表达对T-ALL细胞增殖及硼替佐米敏感性的影响研究

通过检测干扰Notch1基因后Sup T1细胞的增殖、凋亡和Notch1受体基因及其下游靶基因表达水平的变化,探讨Notch信号通路与急性T淋巴细胞白血病发生、发展的关系。

在下调Notch1基因后的Sup T1细胞中加入1ng/μl硼替佐米,检测对Sup T1细胞增殖、凋亡和Notch1受体基因及其下游靶基因表达水平的变化,探讨Notch1基因表达对硼替佐米敏感性的影响。

方法:1.利用携带Notch1特异性和非特异性sh RNA的慢病毒载体包装成病毒颗粒感染Sup T1细胞,选取干扰效率高的感染细胞作为干扰组,分别于48、72、96个小时后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率(Annexin V+/7-AAD-和Annexin V+/7-AAD+);采用实时荧光定量PCR法检测Notch1受体基因及下游靶基因基因Hes1、NF-κB、c-myc的m RNA表达水平。

2. 在感染Sup T1细胞后,分别在第24、48、72小时三个不同时间点加入1ng/μl硼替佐米继续孵育24小时后,采用CCK-8法、流式细胞术、实时荧光定量PCR法检测其在干扰Notch1基因后第48、72、96小时二者共同作用对Sup T1细胞增殖、凋亡及Notch1受体基因及下游靶基因基因Hes1、NF-κB、c-myc的m RNA表达水平的影响。

结果:1.Notch1干扰组细胞的增殖较空白对照组、空载体组明显降低,细胞抑制率较空白对照组、空载体组明显升高(P均<0.05),且细胞增殖的抑制作用呈时间依赖性。

2.干扰组Annexin V-PE+/7-AAD-较空白对照组、空载体组明显升高(P均<0.05);而各组细胞Annexin V-PE+/7-AAD+无明显变化(P>0.05)。

参考文献

[1]Bortezomib salvage therapy in refractory acute adult T-cell leukemia/lymphoma[J].Christopher S.Hourigan,Patrick M.Forde,Richard F.Ambinder,Douglas E.Gladstone.Leukemia&Lymphoma.2013(11)

[2]siRNA targeting Notch-1 decreases glioma stem cell proliferation and tumor growth[J].Jianpeng Wang,Chao Wang,Qinghai Meng,Shifang Li,Xiaopeng Sun,Yongli Bo,Weicheng Yao.Molecular Biology Reports.2012(3)

[3]Tubacin suppresses proliferation and induces apoptosis of acute lymphoblastic leukemia cells[J].Grace I.Aldana-Masangkay,Agustin Rodriguez-Gonzalez,Tara Lin,Alan K.Ikeda,Yao-Te Hsieh,Yong-Mi Kim,Brett Lomenick,Kazuo Okemoto,Elliot M.Landaw,Dongpeng Wang,Ralph Mazitschek,James E.Bradner,Kathleen M.Sakamoto.Leukemia&Lymphoma.2011(8)

[4]research paper:Differential expression of HDAC3,HDAC7 and HDAC9 is associated with prognosis and survival in childhood acute lymphoblastic leukaemia[J].Daniel AntunesMoreno,Carlos AlbertoScrideli,Maria Angélica AbdalaCortez,RosaneDe Paula Queiroz,Elvis TerciValera,VanessaDa Silva Silveira,JoséAndresYunes,Silvia ReginaBrandalise,Luiz GonzagaTone.British Journal of Haematology.2010(6)

[5]杨琦.Notch1基因表达对T-ALL细胞增殖及硼替佐米敏感性的影响[D].山西医科大学,2015.