邻氯苯基乙二醇的制备

背景及概述^[1-2]

邻氯苯基乙二醇是一种有机中间体，可由2-氯苯乙烯在催化剂(S)-1-(2-羟基-1-苯乙基)硫脲修饰的Cr-Anderson型多酸的作用下用双氧水氧化得到；或者由2-羟基邻氯苯乙酮通过毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞还原得到。

制备^[1-2]

报道一、

在干净的反应瓶中加入0.01mol 2-氯苯乙烯，再加入10ml混合溶剂(水和乙腈的摩尔比为1:1～3:1)，最后加入1.7g 30％过氧化氢和0.0216g(S)-1-(2-羟基-1-苯乙基)硫脲修饰的Cr-Anderson型多酸催化剂，反应24h，取5ml乙醇加入反应体系，离心使催化剂沉降，再加入3ml乙醇再次分离催化剂，过滤，得到催化剂，真空干燥。用乙酸乙酯将反应体系萃取3次，所得到的产品减压除去溶剂，柱层析分离得到邻二醇化合物，得到产品。产品的对映体过量由手性高效液相色谱测得，ee值达99％。

报道二、

步骤1、毕赤酵母菌Pichiasp.SIT2014菌体的培养:

所用的斜面培养基，按每升计算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH₂PO₄ 0.5g,K₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，琼脂20.0g，余量为水。

所用的种子培养基，按每升计算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH₂PO₄ 0.5g,K₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，余量为水。

所用发酵培养基，按每升计算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH₂PO₄ 0.5g,K₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，余量为水。

取4℃冰箱保存的毕赤酵母Pichiasp.SIT2014斜面菌种，挑取一环菌种接入到装有15ml种子培养基的100ml摇瓶中，在摇床上控制温度为30℃、转速为180rpm进行种子培养18h，得到种子液；

然后按种子液：发酵培养基的体积比为5％的接种量，将种子液接种到发酵培养基中，在摇床上控制温度为30℃、转速为180rpm进行发酵培养24h，得到的发酵液离心，收获的细胞即为毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞。

最终所得的发酵液经检测，其产羰基还原酶活力约为20～30U/L，发酵液中细胞浓度按干重计算约4～5g/L，即单位细胞产羰基还原酶活力约为4-5U/g干细胞。由此表明，上述所得的毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞对芳基羟基酮具有较强的还原性与选择性。

步骤2、

将步骤1所得的毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞置于缓冲液中；

所述的缓冲液为pH为6.5的磷酸钠水溶液，其用量按毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞干重：缓冲液为10g：1L的比例计算；

向上述所得的含有毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞的缓冲液中加入2-羟基邻氯苯乙酮，然后控制温度为30℃、转速为180r/min进行还原反应20h得到反应液；

上述反应所用2-羟基邻氯苯乙酮的量，按毕赤酵母Pichiasp.SIT2014细胞干重：2-羟基邻氯苯乙酮为0.5g：0.15mmol的比例计算；

将上述所得的反应液控制转速为10000r/min进行离心分离，得到的上清液用等体积的乙酸乙酯萃取三次后，萃取液用无水硫酸钠干燥，然后用旋转蒸发仪蒸干，即得目标产物(S)-邻氯苯乙二醇，转化率为99.9％，ee值为99.2％。

参考文献

[1][中国发明,中国发明授权]CN201610211338.0(S)-1-(2-羟基-1-苯乙基)硫脲修饰的Cr-Anderson型杂多酸催化剂、制备方法及其应用

[2][中国发明,中国发明授权]CN201410735876.0一种将消旋体芳基邻二醇转化为手性芳基邻二醇的方法