达诺司他的制备方法

背景及概述^[1-4]

达诺司他，研发代号NVP-LAQ824，是一种有效的HDAC抑制剂，同时可抑制HDAC1的活性，主要用于癌症研究。在体外，达诺司他激活p21启动子，AC50为0.30μM。 达诺司他抑制肿瘤细胞（H1299，HCT116）的生长，IC50分别为150和10 nM。达诺司他还显示出对两种前列腺癌细胞系（DU145和PC3）和乳腺癌系（MDA435）的抑制活性，IC50分别为18、23、39 nM。达诺司他连续暴露72 h在HCT116细胞中产生的LD90为0.09 M，在A549细胞中产生的LD90为0.47M。 达诺司他处理NDHF细胞不仅会导致预期的G1-S生长停滞，而且还会显着减少S期细胞以及G2-M检查点的细胞蓄积。达诺司他诱导人肿瘤细胞凋亡死亡。达诺司他增加组蛋白H3和H4的乙酰化。达诺司他抑制HDAC1的IC50为9 nM。达诺司他（10和20 nM）抑制表达AML融合蛋白的32D细胞的增殖。达诺司他会损害白血病干细胞的短期植入潜能。达诺司他会耗尽鼠AML1 / ETO和PLZF /RARα阳性HSC的体外自我更新潜能。

制备方法^[1]

将（2E）-3- [4-[[[[2-（1H-吲哚-3-基）乙基]氨基]甲基]苯基] -2-丙酸甲酯（20.00 g，59.81 mmol），β-溴乙醇（21.5 mL，37.9 g，303 mmol）和K₂CO₃在MeCN中的的混合物在60°C加热18 h，冷却，过滤，蒸发滤液。 残余物通过快速色谱法纯化，得到（2E）-3- [4-（[（（2-羟乙基）-[2-（1Hindol-3-基）乙基]氨基]甲基）苯基] -2-丙酸甲基酯（13.97 g，62％）：m/z 379（MH+）。按照方法C，酯（13.90 g，36.73 mmol）转化为异羟肟酸酯并用1当量的乳酸处理后得到达诺司他的乳酸盐（7.44 g，53％）。方法C:在0℃下，向甲酯在MeOH或EtOH中的溶液中加入HONH₂（50％水溶液，10-15当量），然后加入1M NaOH（7-10当量）。将混合物在0℃下搅拌2-4小时，温热至室温，并搅拌直到反应完成（TLC）。用1 M HCl酸化至pH 7-8（pH试纸）导致产品沉淀。过滤沉淀，通过RPHPLC分析，并在必要时通过制备RPHPLC纯化。

参考文献

[1]Remiszewski S W , Sambucetti L C , Bair K W , et al. N-hydroxy-3-phenyl-2-propenamides as novel inhibitors of human histone deacetylase with in vivo antitumor activity: discovery of (2E)-N-hydroxy-3-[4-[[(2-hydroxyethyl)[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]amino]methyl]phenyl]-2-propenamide (NVP-LAQ824).[J]. Journal of Medicinal Chemistry, 2003, 46(21):4609-4624.

[2] Atadja P, et al. Selective growth inhibition of tumor cells by a novel histone deacetylase inhibitor, NVP-LAQ824. Cancer Res. 2004 Jan 15;64(2):689-95.

[3]Cho YS, et al. Conformational refinement of hydroxamate-based histone deacetylase inhibitors and exploration of 3-piperidin-3-ylindole analogues of dacinostat (LAQ824). J Med Chem. 2010 Apr 8;53(7):2952-63.

[4]Romanski A, et al. Deacetylase inhibitors modulate proliferation and self-renewal properties of leukemic stem and progenitor cells. Cell Cycle. 2012 Sep 1;11(17):3219-26.