标签抗体HA,多克隆抗体,兔抗,红细胞凝集素表面抗原决定簇的应用

背景^[1-3]

标签抗体HA,多克隆抗体,兔抗,红细胞凝集素表面抗原决定簇是携带标签抗体HA的兔抗红细胞凝集素表面抗原决定簇多克隆抗体，可以特应性集合红细胞凝集素表面抗原决定簇主要用于检测具有红细胞凝集素特性病毒的表面抗原决定簇。

随着生物技术的发展，科研人员可以通过DNA重组技术，构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白，进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化，以达到研究的需求。

融合标签，如HA、His等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。其中HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutinin epitope:YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白。

血球凝集素（hemagglutinin），是使红血球凝集的抗体或其他物质。在流感病毒、痳疹病毒（以及许多其他细菌和病毒）表面等均能找到，可附着于不同动物的红血球，而使红血球凝集。

红细胞凝集素表面抗原决定簇是由连续序列（蛋白质一级结构）组成或由不连续的蛋白质三维结构组成，决定抗原性的特殊化学基团，又称抗原表位。抗原决定簇大多存在于抗原物质的表面，有些存在于抗原物质的内部，须经酶或其他方式处理后才暴露出来。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大，决定簇的数目越多。

应用^[4][5]

用于基于甲型流感病毒红细胞凝集素颈部保守区表位免疫原的设计及其功能活性的研究

针对1968年至2014年间10,763株H3N2流感病毒序列进行序列分析、B细胞及MHC-II类分子T细胞表位预测,从中获得了高度保守（保守率:97.59%±0.62%）的HA颈部片段及六条衍生多肽免疫原序列（P1P6）。通过免疫原性检测,我们确定了P6多肽序列中含有潜在的B细胞及MHC-II类分子T细胞表位,并且基于P6多肽序列的MAP4及以KLH为载体的免疫原都能够诱导较强的体液免疫反应（抗体效价:log104.144.74）和H3亚型内交叉毒株中和活性（ID50:564.571408,P<0.005）。

经过对已知的H3亚型IAV的HA晶体结构分析,发现P6多肽序列位于病毒膜融合过程中HA2的变构拐点处,进一步通过酸旁路实验及膜融合动力学试验,提出并验证了P6多肽免疫原所诱导的中和抗体的中和机理:锚定HA2变构拐点,通过空间位阻抑制膜融合过程中HA2的变构从而抑制膜融合。此段高保守性HA2颈部表位的设计及中和机理的确定能够为未来流感疫苗的设计应用及流感病毒临床免疫治疗提供参考。

参考文献

[1]Conserved stem fragment from H3 influenza hemagglutinin elicits cross-clade neutralizing antibodies through stalk-targeted blocking of conformational change during membrane fusion[J].Xin Gong,He Yin,Yuhua Shi,Shanshan Guan,Xiaoqiu He,Lan Yang,Yongjiao Yu,Ziyu Kuai,Chunlai Jiang,Wei Kong,Song Wang,Yaming Shan.Immunology Letters.2016

[2]Immunogenicity and protective efficacy of the norovirus P particle-M2e chimeric vaccine in chickens[J].M.Elaish,K.I.Kang,M.Xia,A.Ali,S.A.S.Shany,L.Wang,X.Jiang,C.W.Lee.Vaccine.2015(38)

[3]Protection against Multiple Subtypes of Influenza Viruses by Virus-Like Particle Vaccines Based on a Hemagglutinin Conserved Epitope[J].Shaoheng Chen,Dan Zheng,Changgui Li,Wenjie Zhang,Wenting Xu,Xueying Liu,Fang Fang,Ze Chen,Xuguang Li.BioMed Research International.2015

[4]Multiple antigen peptide mimetics containing gp41 membrane‐proximal external region elicit broad neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus type 1 in guinea pigs[J].Lishuang Zhang,Liang Miao,Xin Gong,Huayan Zhang,Lan Yang,Yuhua Shi,Wei Kong,Chunlai Jiang,Yaming Shan.J.Pept.Sci..2013(8)

[5]龚鑫.基于甲型流感病毒红细胞凝集素颈部保守区表位免疫原的设计及其功能活性的研究[D].吉林大学,2016.