细胞瞬时转染说明
发布日期:2020/7/22 10:00:42
背景[1]
目前全球越来越多的重组抗原及重组抗体用于医疗,尤其针对肿瘤、自身免疫病等难治病症,以及体外诊断试剂。越来越多的高校和企业开始重视重组蛋白新药的开发,这就要求能够快速生产足够候选蛋白用于临床前研究,因此能够快速生产毫克到克级别的重组蛋白瞬时表达体系开始得到广泛应用。
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
简介[1]
细胞瞬时转染后外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其他调控原件的分析。一般来说,细胞瞬时转染方法中超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。
应用特性[1]
目的:快速分析
筛选方法:抗生素抗性
表达持续时间:随细胞分裂而稀释至丢失48-72小时
目的DNA与宿主染色体:未整合
主要参考文献
[1] 孙静静,李桂林,周雷鸣,周伟伟,赵巧辉;哺乳动物细胞瞬时转染技术研究进展。《中国医药生物技术》 2019年03期
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