人受体TNFRSF结合丝氨酸苏氨酸激酶2(RIPK2)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人受体TNFRSF结合丝氨酸苏氨酸激酶2(RIPK2)ELISA KIT用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶2(RIPK2，也称为RICK、RIP2、CARDIAK和CARD3)已涉及多种功能，包括：针对先天免疫系统和适应性免疫系统的整合信号、调节细胞凋亡、控制生肌分化限制点、以及调节核因子-κβ(NFkB)和Jun N-末端激酶(JNK)激活作用。RIPK2由N-末端丝氨酸/苏氨酸激酶催化结构域和含有半胱天冬酶激活和募集结构域(CARD)的C-末端区组成。RIPK2与CLARP(半胱天冬酶样分子)物理相互作用，该CLARP已知结合至具有死亡结构域的Fas相关蛋白(FADD)和半胱天冬酶-8。RIPK2的表达促进半胱天冬酶-8的激活作用并增强通过Fas配体、FADD、CLARP和半胱天冬酶-8诱导的细胞凋亡。缺失突变体分析显示，激酶结构域和半胱天冬酶-募集结构域都需要RIPK2来促进细胞凋亡。显著地，RIPK2突变体(其中在位置38的假定的ATP结合位点的赖氨酸被甲硫氨酸替代)的表达用作CD95介导的细胞凋亡抑制剂。因此，RIPK2代表可以调节由CD95/Fas受体途径诱导的细胞凋亡的新颖的激酶。因为RIPK2的表达在多种细胞类型中影响细胞凋亡的调节，所以RIPK2活性在疾病状态的发展中可以是重要的因素，在那些状态中调节细胞凋亡是至关重要的。

应用^[4][5]

人受体TNFRSF结合丝氨酸苏氨酸激酶2(RIPK2)ELISA KIT用于非经典NF-kB信号通路与B细胞非霍奇金淋巴瘤耐药相关性的初步研究。

B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin’s Lymphoma,B-NHL)是恶性B细胞单克隆扩增的一组异源性恶性致死性疾病。近年来,随着研究和治疗水平的不断提高,尤其是利妥昔单抗(Rituximab)在临床的广泛应用,患者生存期逐渐延长,部分患者可治愈。然而肿瘤细胞耐药常导致治疗无效或病情复发,使一部分患者预后较差。

目前研究表明,核因子KB(Nuclear Factor kappa B,NF-κB)信号通路的活化可能是B-NHL耐药的主要原因之一。B-NHL患者外周血中B细胞活化因子(B cell activating factor blonging to TNF family,BAFF)明显升高,且与疾病的进展性、严重程度及治疗敏感性有关。BAFF受体(B cell activating factor receptor,BAFF-R,BR3)是BAFF专用的调节B细胞存活的特异性受体,而非经典NF-κB信号通路是受BAFF/BAFF-R介导活化的主要通路。在酵母三杂交实验中发现受体相互作用丝/苏氨酸激酶2(Receptor-Interacting Serine/Threonine Kinase2,RIPK2)与BAFF-R、肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor-associated factor3,TRAF3)三者间存在相互作用,其中TRAF3是非经典NF-κB信号通路中的负调分子,具有重要的枢纽作用,提示RIPK2作为细胞内蛋白,可能与BAFF/BAFF-R介导的非经典NF-κB信号通路活化引起的淋巴瘤细胞耐药之间具有潜在的联系。

参考文献

[1]Serum BAFF level and its correlations with various disease parameters in patients with systemic sclerosis and systemic lupus erythematosus[J].Samar M.Fawzy,Tamer A.Gheita,Eman El-Nabarawy,Heba H.El-Demellawy,Olfat G.Shaker.The Egyptian Rheumatologist.2011(1)

[2]BAFF inhibition:A new class of drugs for the treatment of autoimmunity[J].Zheng Liu,Anne Davidson.Experimental Cell Research.2011(9)

[3]Rescue of the mature B cell compartment in BAFF-deficient mice by treatment with recombinant Fc-BAFF[J].Lee Kim Swee,Aubry Tardivel,Pascal Schneider,Antonius Rolink.Immunology Letters.2010(1)

[4]MS80,a novel sulfated polysaccharide,inhibits CD40-NF-κB pathway via targeting RIP2[J].Xiaoguang Du,Shan Jiang,Hongchun Liu,Xianliang Xin,Jing Li,Meiyu Geng,Handong Jiang.Molecular and Cellular Biochemistry.2010(1-2)

[5]刘静.非经典NF-kB信号通路与B细胞非霍奇金淋巴瘤耐药相关性的初步研究[D].中国人民解放军军事医学科学院,2012.