人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)ELISA KIT 的主要应用

背景^[1-3]

人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)水平。用纯化的人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)，再与HRP标记的人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)浓度。

人聚合免疫球蛋白受体（pIgR）是一种100 kDa的I型跨膜糖蛋白。其前体是764个氨基酸。它包含一个18个氨基酸的信号序列，一个620个氨基酸的细胞外区域，一个23个氨基酸的跨膜片段和一个103个氨基酸的细胞质结构域。pIgR由在细胞外区域具有五个Ig样结构域的分泌性上皮细胞合成，并转移至基底外侧质膜。对于IgA和IgM聚合物，除了α-重链和Ig轻链外，还包含并需要一个短的多肽，称为连接链（J链）。pIgR可以结合更大的IgA（pIgA）和五聚体IgM聚合物，作为跨上皮运输IgA和IgM的载体。受体-配体复合物被内吞并转入顶端表面，然后蛋白水解切割pIgR的第六个胞外域并产生分泌性IgA（SIgA），该pIgR片段称为分泌成分（SC）。SIgA是粘膜免疫系统的重要组成部分。SC具有抗微生物特性，可保护SIgA免受蛋白水解降解。

应用^[4][5]

人多免疫球蛋白受体(POLY-IGR)ELISA KIT用于人多聚免疫球蛋白受体pIgR介导EMT的作用研究及机制初探。

多聚免疫球蛋白受体(pIgR)属于I型跨膜糖蛋白,可以与多聚免疫球蛋白A和多聚免疫球蛋白M特异性结合,通过穿胞转运,将它们从上皮细胞基底侧膜转运到顶膜,并最终分泌到外分泌液中去。MDCK是狗的肾上腺皮质细胞,该细胞株因适合作为上皮生物学模型而被广泛应用。在组织培养中,MDCK细胞能够形成上皮致密单层。本课题组前期实验利用真核转染技术,成功构建了人pIgR稳定高表达的MDCK细胞株(命名为MDCK-pIgR,阴性对照组细胞命名为MDCK-mock),在研究pIgR的极性转运时意外发现,MDCK-pIgR细胞株的增殖速加快,表型由柱状变为成肌纤维细胞样,并且,与MDCK-mock组细胞相比,这些细胞的运动性增强。进一步的表明pIgR的表达也许能够促进EMT的发生。采用RT-PCR、Western-Blotting等技术检测了ERK、Snail、角蛋白、F-actin,并采用IP方法探讨pIgR是否能够发生磷酸化调节细胞信号。推测pIgR介导EMT的可能分子机制为:pIgR的高表达促进ERK1/2磷酸化,上调Snail,下调E-钙粘素的表达,粘附连接破坏,细胞骨架重新排列,从而导致EMT的发生。而上述过程是由pIgR Tyr的磷酸化引起的。本论文的研究发现了pIgR在调节EMT中的作用,拓展了pIgR的研究领域。为pIgR的促肿瘤生成作用奠定了基础。提示pIgR是肿瘤治疗中的潜在靶点。基于进一步的评价,在特殊肿瘤组织中抑制pIgR的表达可能会成为阻断肿瘤转移的有效手段。

参考文献

[1]The Role of the IGF System in Cancer Growth and Metastasis:Overview and Recent Insights[J].Amir Abbas Samani,Shoshana Yakar,Derek LeRoith,Pnina Brodt.Endocrine Reviews.2007(1)

[2]Tumor progression—targets for differential therapy[J].Arthur B.Pardee.J.Cell.Physiol..2006(3)

[3]The polymeric immunoglobulin receptor:bridging innate and adaptive immune responses at mucosal surfaces[J].Charlotte S.Kaetzel.Immunological Reviews.2005(1)

[4]Molecular requirements for epithelial–mesenchymal transition during tumor progression[J].Margit A Huber,Norbert Kraut,Hartmut Beug.Current Opinion in Cell Biology.2005(5)

[5]徐思云.人多聚免疫球蛋白受体pIgR介导EMT的作用研究及机制初探[D].中国海洋大学,2008.