BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体的应用

背景^[1-3]

BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体是可以特异性结合BH3结构域凋亡诱导蛋白的一类多克隆抗体蛋白。BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体（Bid）是一个包含促凋亡bcl2家族成员的bh3结构域，作为一种非活性前体，它在细胞的细胞溶质部分被定位。其活性形式是由caspase 8在fas信号通路中蛋白水解酶分解产生的。分裂的bid转位到线粒体并释放其有效的促凋亡活性，进而诱导细胞色素c释放和线粒体损伤。bcl2对bid的细胞色素c释放活性有拮抗作用。SH3域突变可降低细胞色素c释放活性。在动物模型研究中，发现BID缺陷小鼠对通过FAS传递的死亡因子信号的致死效应有抵抗力。

BH3相互作用域死亡激动剂（BID）是Bcl-2蛋白家族的成员，该家族调节外部线粒体膜通透性。BID是促凋亡成员，可导致细胞色素c从线粒体膜间空间释放到细胞质中。。BID仅包含BH3域，这是其与Bcl-2家族蛋白相互作用和促死亡活性所必需的。BID易受半胱氨酸蛋白酶，钙蛋白酶，颗粒酶B和组织蛋白酶的蛋白水解切割。它是内在死亡途径的整合关键调节因子，可放大神经元凋亡的caspase依赖性和caspase依赖性执行。因此，BID的药理抑制作用在程序性细胞死亡突出的神经系统疾病中提供了一种有前途的治疗策略，也为与缺血再灌注相关的急性肾衰竭提供了新的策略。

应用^[4][5]

BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体用于miRNA-1297通过靶向BH3结构域凋亡诱导蛋白促进肝细胞癌的进展研究。

分析109对肝癌组织和配对的癌旁组织中mi R-1297的表达情况。从上述队列患者的生存资料中分析mi R-1297的表达与肝癌患者预后的关系。应用qRT-PCR技术检测肝细胞癌中miR-1297上调表达的机制。应用CCK8试验测定miR-1297在肝细胞癌发生发展中的作用。用AnnexinV/丙碘化物染色检测HCC细胞凋亡。用蛋白质免疫印迹分析法研究与BH3结构域凋亡诱导蛋白(BID)的表达。结果相对癌旁正常组织和人正常肝细胞,mi R-1297在肝癌组织和肝癌细胞中表达上升。Kaplan-Meier分析提示癌组织中高表达miR-1297的肝癌患者预后较差。在SMMC-7721和HepG2转染miR-1297表达抑制剂可抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡。生物信息学分析提示BID为miR-1297直接调控靶基因;荧光素酶报告基因检测提示mi R-1297可与BIDm RNA3’UTR结合;蛋白质印迹分析证实miR-1297可抑制肝癌细胞BID蛋白的表达。进一步研究提示,抑制miR-1297表达显著提高线粒体中tBID和细胞色素C的表达水平。拯救实验证实在肝癌细胞中mi R-1297通过靶向BID蛋白抑制肝癌细胞凋亡。结论证实miR-1297通过靶向BID促进肝癌的进展,提示其可能是肝细胞癌患者潜在的预测预后的临床标志物和治疗靶点。

参考文献

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