人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中白三烯D4(LTD4)的水平。向预先包被了白三烯D4(LTD4)单克隆抗体的酶标孔中加入白三烯D4(LTD4)，温育；温育后，加入生物素标记的抗白三烯D4(LTD4)抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中白三烯D4(LTD4)的浓度呈正相关。对于具有多个表位的抗原而言，双夹心ELISA（Double SandwichELISA）可应用于目标抗原或抗体的定量检测。而对于小分子抗原或半抗原，因缺乏可作夹心法的两个以上的结合位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定。此时，可以采用竞争抑制法模式来检测其中靶分子的含量。竞争抑制ELISA又叫封闭ELISA，其主要原理是将标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅，也就是说，最终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。

支气管哮喘(哮喘)时气道阻塞的机制与气道平滑肌收缩，血管渗漏所致粘膜水肿、粘液分泌增加及以嗜酸细胞为主导的炎症细胞浸润等引起的支气管痉挛有关，多种炎性介质如组胺、白三烯(LTs)、血栓素、前列腺素、血小板激活因子(PAF)、趋化因子、腺苷及缓激肽等，参与上、下气道的炎症反应。近年来随着LTs在哮喘气道高反应性中的作用逐渐被认识，以及LTs受体部位被确认，白三烯受体拮抗剂(LTRA)与LTs合成抑制剂在防治哮喘中的地位引起关注。

应用^[4][5]

人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT用于炎症介质白三烯D4在慢性乙型肝炎和原发性肝癌发生发展中的作用研究。

Leukotriene D4(LTD4)在慢性乙型肝炎(CHB)和原发性肝癌(HCC)患者血清中的表达水平,并分析其与血清ALT、AST、γ-GT、HBV-DNA和AFP间的相关性,进而探讨LTD4在CHB和HCC发生发展中的作用。应用酶联免疫法(ELISA)检测血清中LTD4水平,全自动生化仪检测ALT、AST、γ-GT水平,化学发光仪和基因扩增仪分别检测AFP和HBV-DNA。结果:CHB和HCC患者血清LTD4水平均明显高于对照组(P<0.01),且其水平在CHB组、HCC合并HBV组、单独HCC组及对照组中逐渐下降。在CHB中,慢性肝炎与重型肝炎比较,LTD4水平差异无统计学意义(P>0.05);且LTD4水平与ALT、AST、γ-GT及HBV-DNA含量间无相关性(P>0.05)。在HCC中,合并HBV组与单独HCC组相比,LTD4水平有显著性差异(P<0.01);分别比较转移组与无转移组、治疗组与未治疗组,结果差异均无统计学意义(P>0.05);LTD4水平仅与ALT呈正相关(P<0.05),而与AST、γ-GT、AFP无相关性(P>0.05)。结论:LTD4作为重要的炎症介质,可能参与了CHB的发生发展,并在促进CHB向HCC进展的过程中起着一定的作用,而且对肝癌细胞自身的肿瘤生物学产生影响。

参考文献

[1]Hepatitis B virus-related hepatocarcinogenesis:Molecular oncogenic potential of clear or occult infections[J].Maria Stella De Mitri,Romina Cassini,Mauro Bernardi.European Journal of Cancer.2010(12)

[2]Overexpression of 5-lipoxygenase in sporadic colonic adenomas and a possible new aspect of colon carcinogenesis[J].International Journal of Colorectal Disease.2010(9)

[3]Leukotriene D 4 induces gene expression in human monocytes through cysteinyl leukotriene type I receptor[J].Grzegorz Woszczek,Li-Yuan Chen,Sahrudaya Nagineni,Steven Kern,Jennifer Barb,Peter J.Munson,Carolea Logun,Robert L.Danner,James H.Shelhamer.The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2008(1)

[4]Overexpression of cysteinyl LT1 receptor in prostate cancer and CysLT1Rantagonist inhibits prostate cancer cell growth through apoptosis[J].Masahide Matsuyama,Takuma Hayama,Kiyoaki Funao,Yutaka Kawahito,Hajime Sano,Yoshiaki Takemoto,Tatsuya Nakatani,Rikio Yoshimura.Oncology Reports.2007(1)

[5]周艳.炎症介质白三烯D4在慢性乙型肝炎和原发性肝癌发生发展中的作用[D].华中科技大学,2011.