维生素E琥珀酸酯的制备和生物活性研究

背景及概述^[1]

维生素E琥珀酸酯(VitaminESuccinate，VES)是维生素E的衍生物，一些研究表明VES可将肿瘤细胞周期阻断在G1期和促进肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞DNA合成、增加转移生长因子β(TGF-β)的分泌与活化并使TGF-βII型受体表达增强，还可诱导肿瘤细胞凋亡。

在国外试验研究中已证明，VES发挥抗增生作用的肿瘤细胞包括鼠类和人类的神经母细胞瘤、大鼠神经胶质瘤、鼠类B-16黑色素瘤、人类前列腺癌、鸟类淋巴细胞瘤、人类早幼粒细胞白血病、人类乳腺癌、人类B淋巴细胞瘤、鼠类EL4T淋巴细胞瘤等恶性细胞，VES对肿瘤生长的抑制在整体试验中也得到证实，在地鼠颊部上皮癌动物模型中，肿瘤局部注射VES(4周)可引起肿瘤的消退。更令人振奋的是VES对正常细胞却没有毒性，亦无生长抑制作用，这更表明了VES的应用前景。

制备^[1]

采用的各成份配比是(重量比)：维生素E1份，琥珀酸酐0.25份在20份的三乙醇铵中，温度为40℃的条件下反应3小时即可制得维生素E琥珀酸酯(VES)+H₂O。

生物活性研究^[2-4]

杨睿等人探究了维生素E琥珀酸酯联合化疗药物对乳腺癌增殖的抑制作用。方法：将人乳腺癌细胞株Bcap-37置于培养基中培养,分别加入维生素E琥珀酸酯、环磷酰胺及丝裂霉素,作用24h、36h后观察Bcap-37的生长状况。并设置一组不加任何药物的含人乳腺癌细胞株Bcap-37的培养基作为对照组。使用仪器检测癌细胞的增殖,分析细胞周期,检测细胞表面Fas表达。结果VES与化疗药物联合使用对乳腺癌细胞的生长抑制作用明显增强,分别为76.70%、90.14%;64.13%、80.88%。与使用单一药物相比,明显增强,具有统计学意义,P<0.05。VES与化疗药物MMC、CTX联合使用时,Bcap-37细胞的凋亡率在24h内分别提高到4.8%、39.6%。经VES与化疗药物MMC、CTX联合处理后,Bcap-37细胞的平均荧光强度和阳性率分别为:22.0、100%;18.7、100%。结论：维生素E琥珀酸酯联合化疗药物对乳腺癌增殖有显著的抑制作用。

于静等人探讨了维生素E琥珀酸酯（vitaminEsuccinate,VES）对HER-2过表达乳腺癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法测定VES对乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞增殖的抑制作用,应用Westernblot法筛选HER-2过表达乳腺癌细胞系,同时检测VES处理后GSK-3、NF-κBp65、caspase9蛋白在乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞中的表达水平,划痕实验与侵袭实验观察VES对乳腺癌细胞体外迁移能力的影响,流式细胞术检测VES对乳腺癌细胞凋亡的作用。结果:VES处理后GSK-3、NF-κBp65、caspase9蛋白在乳腺癌MDA-MB-453细胞中的表达明显高于在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,VES作用于HER-2低表达乳腺癌细胞使其迁移及侵袭能力明显增强,却能够抑制HER-2高表达乳腺癌细胞的迁移及侵袭。VES以直接杀伤方式作用MDA-MB-231细胞,而对MDA-MB-453则以诱导细胞凋亡方式杀伤,VES使HER-2高表达乳腺癌MDA-MB-453细胞发生G1/G0期阻滞。结论:VES促进乳腺癌细胞凋亡是通过影响多条信号传导途径完成的,VES作用于不同HER-2表达乳腺癌细胞其迁移及侵袭能力明显不同,其机制与细胞表面蛋白表达有关。

黄晓莉等人探讨了维生素E琥珀酸酯(VES)对人胃癌细胞未折叠蛋白反应的影响。方法:采用Westernblot法分析VES不同剂量(0、5、10和20μg/mL)处理人胃癌SGC-7901细胞24h和20μg/mLVES处理SGC-7901细胞不同时间(0、6、12、18和24h)对内质网膜上的跨膜蛋白PKR样内质网蛋白激酶(PERK)磷酸化和活化转录因子6(ATF6)活化的影响;采用RT-PCR法检测VES不同剂量(0、5、10和20μg/mL)处理SGC-7901细胞24h和20μg/mLVES处理SGC-7901细胞不同时间(0、3、6、9、12、15、18和24h)对活化转录因子4(ATF4)mRNA表达和X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪切的影响。结果:在翻译水平上VES对磷酸化PERK的诱导作用具有时间依赖关系,与阴性对照组比较,10μg/mLVES的诱导作用最强(P<0.05);在翻译水平上VES对ATF6活化片段的诱导作用具有时间依赖关系和剂量依赖关系;在转录水平上,随着作用时间的延长,VES对ATF4mRNA的诱导作用也不断增强,18h达到高峰,而XBP1mRNA从VES作用6h即开始出现剪切。结论:VES诱导人胃癌SGC-7901细胞发生内质网应激过程中,未折叠蛋白反应相关信号分子被活化。

参考文献

[1][中国发明,中国发明授权]CN01106140.5维生素E琥珀酸酯注射液的生产工艺【公开】/维生素E琥珀酸酯的合成工艺【授权】

[2]杨睿,时冉冉.维生素E琥珀酸酯联合化疗药物对乳腺癌增殖的抑制作用[J].智慧健康,2019,5(11):11-12+15.

[3]于静,姜秋颖.维生素E琥珀酸酯诱导HER-2过表达乳腺癌细胞凋亡机制的研究[J].现代肿瘤医学,2019,27(02):196-201.

[4]黄晓莉,吴坤,赵莎莎.维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞发生未折叠蛋白反应的研究[J].癌变·畸变·突变,2017,29(04):256-259+265.