盐酸尼洛替尼的杂质制备

背景及概述^[1]

盐酸尼洛替尼 ( nilotinib)，商品名达希纳 ( Tasigna)，是由瑞士诺华制药公司研发的 ABL 酪氨酸激酶抑制剂。该药于2007 年 10 月获美国 FDA 批准上市，主要用于治疗既往治疗耐药或不耐受的费城染色体阳性的慢性髓性白血病 (Ph+CML) 慢性期或加速期成人患者。

临床应用^[2]

江文华等人探讨了尼洛替尼(达希纳)治疗慢性粒细胞白血病的临床效果及安全性。方法选择2011年1月至2012年10月收治的慢性粒细胞白血病患者42例,均予口服尼洛替尼,每次400 mg,每天2次。结果完全血液学缓解率为慢性期为93.75%,加速期为66.67%,急变期为37.50%;完全遗传学缓解率分别为58.06%,33.33%,25.00%;部分遗传学缓解率分别为80.66%,66.67%,37.50%。血液学不良反应中Ⅲ级血小板减少9例,粒细胞减少和贫血各6例,程度轻微,无Ⅲ级及以上贫血发生。在血液学不良反应中大多数可通过调整剂量或加用粒细胞集落刺激因子控制。治疗过程中非血液学不良反应的发生率较高,如恶心、呕吐、头痛等,程度较为轻微,患者可耐受,不影响后期治疗。结论尼洛替尼(达希纳)治疗慢性粒细胞白血病疗效显著,无明显不良反应。

杂质合成^[3]

盐酸尼洛替尼杂质的制备方法，其化学结构式如式II～V所示，化学名称分别为：4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3- 基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式II)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯 基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三 氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1- 基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)。

式II化合物的制备

将式VI化合物(3.5g)，甲苯(35ml)，氯化亚砜(14ml)加入反应瓶中，升温至80℃ 反应5h。将反应液旋干，加入3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，乙腈(70ml)， 升温至80℃反应7h。将反应液浓缩，得到黑色油状物，将黑色油状物用硅胶柱分离纯化，洗 脱剂为二氯甲烷：甲醇＝30：1，收集产品，浓缩后得到2.9g式II化合物，摩尔收率为69％， HPLC纯度98.40％。ESI-MS(m/z):543.9[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:10.62 (s，1H，CONH),9.30(s，1H，ArH),9.18(s，1H，NH)，8.70(s，1H，ArH),8.56(d， J＝4.8Hz，1H，ArH),8.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),8.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),8.34 (d，J＝1.6Hz，1H，ArH),8.31(s，1H，ArH),8.23(s，1H，ArH),8.18(s，1H，ArH), 7.77(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H，ArH),7.75(s，1H，ArH),7.51～7.54(m，2H，ArH),7.49 (d，J＝4.8Hz，1H，ArH),7.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),2.55(m，J＝7.4Hz，2H，CH2), 2.37(s，3H，CH3),1.22(t，J＝7.4Hz，3H，CH3)；¹³C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ:166.16, 162.12,161.51,160.03,151.91,148.61,141.84,138.67,138.46,137.30,135.43,134.73,132.60, 132.27,131.79,131.16,130.91,124.70,124.27,123.99,122.78,115.43,114.70,113.67,112.03, 108.45,21.69,18.70,13.80。

式III化合物的制备

将式VI化合物(3.5g)，四氢呋喃(25ml)，草酰氯(15ml)加入反应瓶中，升温至60℃ 反应6h。将反应液旋干，加入3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，甲苯 (100ml)，升温至70℃反应6h。将反应液浓缩，得到黑色固体，将黑色固体用硅胶柱分离纯 化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝50：1，收集产品，浓缩后得到2.5g式III化合物，摩尔收率 为59％，HPLC纯度99.03％。ESI-MS(m/z):543.9[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz，CDCl3):9.32 (d,J＝2.0Hz,1H,ArH),8.85(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),8.69(dd,J＝4.8、1.6Hz,1H,ArH),8.66 (s,1H,CONH),8.56(d,J＝5.6Hz,1H,ArH),8.39(dt,J＝8.0、2.0、1.6Hz,1H,ArH),8.10 (d,J＝1.6Hz,1H,ArH),7.91(s,1H,ArH),7.61(dd,J＝7.8、1.8Hz,1H,ArH),7.43(dd,J＝ 7.8、5.0Hz,1H,ArH),7.38(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),7.30(s,1H,ArH),7.25(d,J＝5.6Hz,1H, ArH),7.18(s,1H,NH),6.80(d,J＝0.8Hz,1H,ArH),2.47(s,3H,CH3),2.40(s,3H,CH3), 2.25(s,3H,CH3)；¹³C-NMR(100MHz，CDCl3)δ:166.22,162.79,160.32,159.09,151.70,148.43, 143.82,140.29,139.16.,137.83,137.08,134.45,132.58,132.50,132.42,132.26,131.03,123.74, 122.33,121.91,119.93,119.54,117.05,116.75,115.84,108.79,18.22,13.81,13.32。

式IV化合物的制备

将式VI化合物(0.4g)，乙腈(4ml)，氯化亚砜(1.8ml)加入反应瓶中，升温至80℃反 应5h。将反应液旋干，加入乙腈(10ml)，3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(0.2g)， 升温至60℃反应4h。将反应液浓缩，得到黄色固体，将此固体用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为 二氯甲烷：甲醇＝40：1，收集产品，浓缩后得到0.27g式IV化合物，摩尔收率为61％，HPLC 纯度99.49％。ESI-MS(m/z):529.9[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ:9.32(d,J＝1.6Hz, 1H,ArH),8.85(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),8.68(dd,J＝4.8、1.6Hz,1H,ArH),8.62(s,1H,CONH), 8.55(d,J＝5.3Hz,1H,ArH),8.38(dt,J＝8.0、1.9、1.9Hz,1H,ArH),8.10(t,J＝1.8Hz,1H,ArH), 7.97(s,1H,ArH),7.62(s,1H,ArH),7.60(dd,J＝7.8、1.8Hz,1H,ArH),7.42(dd,J＝7.8、 4.8Hz,1H,ArH),7.38(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),7.31(s,1H,ArH),7.25(d,J＝5.3Hz,1H,ArH), 7.16(s,1H,NH),6.93(s,1H,ArH),2.46(s,3H,CH3),2.25(s,3H,CH3)；¹³C-NMR(100MHz， CDCl₃)δ:166.04,162.87,160.27,159.16,151.80,148.44,140.25,137.94,137.76,136.90,134.44, 132.68,132.52,132.46,132.26,131.18,127.99,127.94,123.79,123.21,122.18,120.10,119.00, 117.40,116.22,108.94,18.26,9.95。

式V化合物的制备

将式VI化合物(3.5g)，异丙醚(30ml)，氯化亚砜(16ml)加入反应瓶中，升温至70℃ 反应6h。将反应液旋干，加入3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，N-甲基吡咯烷酮 (60ml)，升温至90℃反应4h。将反应液浓缩，得到油状物，将此油状物用硅胶柱分离纯化， 洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝30：1，收集产品，浓缩后得到2.5g式V化合物，摩尔收率为56％， HPLC纯度99.00％。ESI-MS(m/z):515.9[M+H]+；¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:10.70 (s，1H，CONH),9.29(s，1H，ArH),9.17(s，1H，NH),8.69(d，J＝3.2Hz，1H，ArH), 8.56(d，J＝4.8Hz，1H，ArH),8.45(d，J＝7.2Hz，1H，ArH),8.35(s，2H，ArH),8.34 (s，1H，ArH),8.23(s，1H，ArH),7.80(s，2H，ArH),7.78(s，1H，ArH),7.52(dd， J＝7.2，3.2Hz，1H，ArH),7.49(d，J＝5.6Hz，1H，ArH),7.45(s，1H，ArH),7.17(s， 1H，ArH),2.37(s，3H，CH3)；¹³C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ:166.20,162.11,161.52,160.04, 151.90,148.61,141.90,138.67,138.34,136.28,134.75,132.59,132.27,131.48,131.16,130.91, 130.76,124.74,124.25,124.03,122.75,118.65,116.04,115.16,112.55,108.45,18.70。

参考文献

[1]黄俊杰,廖明毅,郭起,尤启冬.盐酸尼洛替尼有关物质的合成[J].中国医药工业杂志,2016,47(02):142-146.

[2]江文华,解敏君,唐小万,王娴婷,陈莉莉.尼洛替尼治疗慢性粒细胞白血病42例[J].中国药业,2013,22(09):94-95.

[3] [中国发明] CN201510970535.6 盐酸尼洛替尼杂质的制备方法