U87MG 人恶性胶质母细胞瘤细胞的应用

背景^[1-3]

U87MG人恶性胶质母细胞瘤细胞是一种致病细胞，引发胶质母细胞瘤，由Ponten J等建立，源于恶性神经胶质瘤。裸鼠皮下接种可成瘤。。

因肿瘤为高度恶性，生长快、病程短，自出现症状到就诊时多数在3个月之内，约70%-80%在半年以内。个别病例因肿瘤出血，可呈卒中样发病。偶尔可见病程较长者，可能肿瘤早期较为良性，随肿瘤生长而发生恶性转化有关。由于肿瘤生长迅速，脑水肿广泛，颅内压增高症状明显，几乎全部病人都有头痛、呕吐、视神经乳头水肿。约33%的病人有癫痫发作。约20%的病人表现淡漠、痴呆、智力减退等精神症状。肿瘤浸润性破坏脑组织，造成一系列的局灶症状，病人有不同程度的偏瘫、偏身感觉陈碍、失语和偏盲等。病人可因肿瘤出血而出现脑膜刺激症状，而癫痫的发生率较星形细胞瘤和少技胶质细胞瘤少见。

胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤。肿瘤位于皮质下，多数生长于幕上大脑半球各处。呈浸润性生长，常侵犯几个脑叶，并侵犯深部结构，还可经胼胝体波及对侧大脑半球。发生部位以额叶最多见。它的增殖能力非常强，发病部位不同，患者的症状也不一样；胶质母细胞瘤的治疗包括手术切除、放疗、化疗及其他综合治疗，首选手术切除。

应用^[4][5]

用于PRDX-1在人胶质瘤恶性进展中的作用及分子机制的初步研究

胶质瘤是人常见的颅内恶性肿瘤，传统的手术及放化疗效果不显著。之前在诺帝(Nordy)诱导人恶性胶质瘤细胞U87MG分化的研究中发现瘤细胞在诱导分化后增殖活性明显降低，且PRDX-1蛋白(Peroxiredoxin1，过氧化物氧化还原蛋白1表达显著减少，故推测PRDX-1可能与胶质瘤的恶性进展密切相关。

通过检测PRDX-1及其可能影响的分子通路的主要蛋白PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在人胶质瘤组织中的表达水平并分析其与胶质瘤恶性程度的相关性，同时构建过表达及抑制PRDX-1表达的慢病毒载体并转染入人恶性胶质瘤细胞U87MG中，观测其生物学特征改变，探索PRDX-1在胶质瘤演变过程中的作用及可能的分子机制。

构建3组针对人PRDX-1基因的shRNA慢病毒表达载体，将其转染至人恶性胶质瘤细胞U87MG，筛选并建立稳定感染细胞系，Western blot、RT-PCR检测转染效率，并选择抑制效率最高的细胞株检测转染前后U87MG细胞凋亡水平，集落形成能力，绘制生长曲线，免疫细胞化学染色检测PRDX-1，PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在转染前后表达水平有无显著变化。

构建针对人PRDX-1基因的过表达慢病毒载体，并转染至人恶性胶质瘤细胞U87MG，筛选并建立稳定感染细胞系，Western blot、RT-PCR检测转染效率，同时检测转染前后U87MG细胞凋亡水平，集落形成能力，绘制生长曲线，免疫细胞化学检测PRDX-1，PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在转染前后表达水平有无显著变化。

参考文献

[1]Role of Peroxiredoxin I in Rectal Cancer and Related to p53 Status[J].Miao-Fen Chen,Kuan-Der Lee,Chung-Hung Yeh,Wen-Cheng Chen,Wen-Shih Huang,Chih-Chien Chin,Paul-Yang Lin,Jeng-Yi Wang.International Journal of Radiation Oncology,Biology,Physics.2010(3)

[2]PTEN inhibits the migration and invasion of HepG2 cells by coordinatelydecreasing MMP expression via the PI3K/Akt pathway[J].Tao Tian,Ke-Jun Nan,Hui Guo,Wen-Juan Wang,Zhi-Ping Ruan,Shu-Hong Wang,Xuan Liang,Chuang-Xin Lu.Oncology Reports.2010(6)

[3]Reactive oxygen species(ROS)in multistage carcinogenesis[J].Mihalis Panayiotidis.Cancer Letters.2008(1)

[4]Transgenic Xenopus with prx1 limb enhancer reveals crucial contribution of MEK/ERK and PI3K/AKT pathways in blastema formation during limb regeneration[J].Makoto Suzuki,Akira Satoh,Hiroyuki Ide,Koji Tamura.Developmental Biology.2007(2)

[5]刘金戈.PRDX-1在人胶质瘤恶性进展中的作用及分子机制的初步研究[D].第三军医大学,2014.