(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐的制备

背景及概述^[1]

(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐是一种医药中间体，有文献报道可将其用于制备将内源蛋白质募集至E3泛素连接酶以进行降解的功能的化合物。该中间体可由（2S，4R）2-（（（4-溴苄基）氨基甲酰基）-4-羟基吡咯烷-1-羧酸-叔丁基（12.9 g，32 mmol）、4-甲基噻唑和（S）-2-（叔丁氧羰基）氨基）-3,3-二甲基丁酸通过三步制备得到。

制备^[1]

步骤一、（2S，4R）-叔丁基4-羟基-2-（（（4-（4-甲基噻唑5-基）苄基）氨基甲酰基）吡咯烷-1-甲酸的制备

在氮气气氛下，将（2S，4R）2-（（（4-溴苄基）氨基甲酰基）-4-羟基吡咯烷-1-羧酸-叔丁基（12.9 g，32 mmol），4-甲基噻唑（5.9 mL，65 mmol），乙酸钯（II）（0.145 g，0.65 mmol）和乙酸钾（6.34 g，65 mmol）的N-甲基2-吡咯烷酮（将80mL）在120℃下搅拌18小时。冷却至环境温度后，加入水（100ml），产物用乙酸乙酯（4×300mL）萃取。合并的有机相用盐水（5×200mL）洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。通过快速色谱法（750g硅胶柱）纯化产物，使用0％至10％甲醇的二氯甲烷溶液的梯度洗脱，得到标题化合物。产量8.0g，59％。 LCMS RT ＝ 0.75分钟，ES + ve m/z 418 [M+H] ⁺。

步骤二、（2S，4R）-4-羟基-N-（4-（4-甲基噻唑5-基）苄基）吡咯烷-2-羧酰胺盐酸盐的制备

（2S，4R）-叔丁基4-羟基-2-（（（4-（4-甲基噻唑5-基）苄基）氨基甲酰基）吡咯烷-1-甲酸（8 g，19 mmol）在甲醇（30mL）和二氯甲烷（20mL）的混合溶液用4M盐酸的1，4-二恶烷（8mL，32mmol）处理。将混合物在环境温度搅拌2小时。将溶剂蒸发至干，并将残余物在二氯甲烷中研磨，过滤并在真空下干燥，得到标题化合物。产量6.7g，99％。 LCMS RT ＝ 0.51分钟，ES + ve m/z 318 [M+H]⁺。

步骤三、(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酰基)-4-羟基-N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐的制备

向（2S，4R）-4-羟基-N-（4-（4-甲基噻唑5-基）苄基）吡咯烷-2-羧酰胺盐酸盐（70mg，0.20mmol）和（S）-2-（叔丁氧羰基）氨基）-3,3-二甲基丁酸（50 mg，0.22 mmol）的DMF（1 mL）溶液中加入DIPEA（0.14 mL，0.79 mmol）和HATU (90 mg, 0.24 mmol)，并在环境温度下搅拌30分钟。产物通过质量导向的自动制备型HPLC（甲酸改性剂）进行纯化，得到中间体boc保护的产物。然后将中间体溶于二氯甲烷（0.5 mL）和甲醇（0.1 mL）的混合物中，并用4M盐酸的1,4-二恶烷（0.25 mL，1,0 mmol）溶液处理，在环境温度下搅拌1小时后将反应混合物蒸发至干，并将残余物用二氯甲烷研磨成固体，并在真空下干燥，得到标题化合物。产率76mg，82％。 LCMS RT ＝ 0.58分钟，ES + ve m/z 431 [M+H]⁺。

主要参考资料

[1] [中国发明] CN201380013806.8 通过E3泛素连接酶增强靶蛋白质及其他多肽降解的化合物和方法