胆色素染色液(改良Fouchet法)应用

背景^[1-3]

胆色素染色液(改良Fouchet法)主要由Fouchet染色液A、Fouchet染色液B、复红染液、PA溶液组成。胆色素染色液(改良FOUCHET法)采用改良Fouchet法，利用铁的氧化作用使胆绿素呈绿色，纤维呈染色后黑色素呈黑色，该法属于常用的黑色素特殊染色法，效果较其他染色理想。在染色技术中，大多数情况下胆色素是指所有以相同反应方式的所有类型胆色素的总成，这包括结合胆红素、非结合胆红素、胆绿素、类胆红素等。这些物质的化学结构各异，物理性质各异，特别是其在水和乙醇中溶解性差异较大。大多数肝组织切片在显微镜下都是胆绿素、结合胆红素、非结合胆红素的混合物。多见于胆管阻塞、胆红素代谢异常、肝细胞坏死或退化等。在肝组织学检查中，鉴别胆色素与脂褐素很重要，普通HE染色中二者都呈黄褐色，不易区分。

【使用方法】

1、固定:10%中性福尔马林是的固定液，其他固定液亦可。

2、切片厚度5mm，将实验切片及对照切片入蒸馏水。

3、入Fouchet染色液，避光浸染5～10min。

4、流水冲洗后，蒸馏水稍洗。

5、入VG染色液浸染或滴染1～2min。

6、流水快速冲洗一下，立即95%乙醇快速分化。

7、无水乙醇脱水，二甲苯透明、中性树胶封固。

应用^[4][5]

用于原发性病理性十二指肠胃反流致病因素、诊断、发病机理及清热理气冲剂胃黏膜保护作用的研究

原发性病理性十二指肠胃反流致病因素的临床研究目的:通过胃内胆汁反流和pH值联合动态监测,探讨原发性病理性十二指肠胃反流胃黏膜病变、Hp感染、胆汁反流和碱反流之间的关系。方法:1研究对象:原发性病理性十二指肠胃反流(DGR)组43例,男性25例,女性18例,年龄21～63岁,上述病例符合相应纳入标准。2应用便携式胆汁监测仪(Bilitec 2000)和便携式pH监测仪监测胃内24小时胆汁反流和pH变化情况,以胆红素吸收值≥0.25的时间百分比和pH≥4的时间百分比作为评价的主要观察指标。所有病例均行胃镜检查,取胃黏膜组织活检,分别行快速尿素酶试验、改良Giemsa染色和HE染色,以确定有无幽门螺杆菌(Hp)感染和根据新悉尼系统标准观察胃黏膜慢性炎症、活动性、萎缩、肠化等组织学特征,分为无、轻度、中度和重度4级,分别记0、1、2、3分,总分为新悉尼系统病理积分;同时采用胃黏膜病理Dixon积分。

结果:1原发性病理性DGR患者根据Hp感染的有无分为Hp阳性组14例,Hp阴性组29例;根据胆汁反流的程度分为高反流组21例,低反流组22例。高反流组及低反流组Hp感染率分别为14.3%(3/21)及50%(11/22),高反流组Hp感染率显著低于低反流组(P<0.05)。2高反流组胃窦和胃角部黏膜肠上皮化生的检出率显著高于低反流组(P<0.05)。Hp阳性组胃窦部黏膜新悉尼系统病理积分显著低于Hp阴性组(P<0.05),Hp阳性组胃角和胃体部黏膜新悉尼系统病理积分与Hp阴性组之间无显著性差异(P>0.05)。高反流组胃窦部黏膜新悉尼系统病理积分显著高于低反流组(P<0.05),高反流组胃角和胃体部黏膜新悉尼系统病理积分与低反流组之间无显著性差异(P>0.05)。Hp阳性组胃窦、胃角和胃体部黏膜Dixon积分与Hp阴性组之间无显著性差异(P>0.05)。

参考文献

[1]Duodenal reflux produces hyperproliferative epithelial esophagitis—A possible precursor to esophageal adenocarcinoma in the rat[J].Colman K.Byrnes,Anil Bahadursingh,Nabeel Akhter,Narasimham L.Parinandi,Viswanathan Natarajan,Elizabeth Montgomery,Tarik Tihan,Mark D.Duncan,Petra H.Nass,John W.Harmon.Journal of Gastrointestinal Surgery.2003(2)

[2]Bile Acid Reflux and Possible Inhibition of Helicobacter pylori Infection in Subjects Without Gastric Surgery[J].Yukinobu Kawai,Susumu Tazuma,Masaki Inoue.Digestive Diseases and Sciences.2001(8)

[3]Proliferation and apoptosis in gastric antral epithelial cells of patients infected with Helicobacter pylori[J].Tae Jung Jang,Jung Ran Kim.Journal of Gastroenterology.2000(4)

[4]Antibacterial action of bile acids against Helicobacter pylori and changes in its ultrastructural morphology:effect of unconjugated dihydroxy bile acid[J].Masaharu Itoh,Kaori Wada,Satoko Tan,Yohei Kitano,Junko Kai,Isao Makino.Journal of Gastroenterology.1999(5)

[5]韩俊岭.原发性病理性十二指肠胃反流致病因素、诊断、发病机理及清热理气冲剂胃黏膜保护作用的研究[D].河北医科大学,2006.