酸性α乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)的使用说明

背景及概述^[1]

酸性α乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液，其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚，α-萘酚再与六偶氮副品红偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质。酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)对酯酶染色无特异性，可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色，亦可作氟化钠抑制试验。

酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

操作说明^[1]

1.血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片入ANAE固定液固定10-15min。

2.水洗5min。

3.入配置好的ANAE孵育液，放入湿盒中，室温避光孵育1h，水洗。

4.入甲基绿染色液复染5-15min，水洗，镜检。

染色结果^[1]

细胞质：暗红色/棕色

细胞核：绿色

氟化钠抑制实验^[1]

按ANAE抑制剂：ANAE孵育液=1：25的比例，在ANAE孵育液中加入ANAE抑制剂，其余按上述染色法进行。

注意事项^[1]

1.血液或骨髓细胞涂片应新鲜，薄厚适宜，一般2天内染色，否则会影响酶的活性。

2.ANAE孵育液易失效或降低阳性程度，即配即用，不宜久置。

3.ANAE孵育液配置后易出现浑浊，但不会影响染色效果。

4.单核细胞为中度阳性至强阳性，对ANAE抑制剂敏感。正常粒细胞呈阴性反应。

5.每次染色时，应有阳性对照。

主要参考资料

[1]酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)说明书