黏液HID-AB染色液的使用说明
发布日期:2020/4/29 15:36:11
背景及概述[1]
黏液HID-AB染色液又称高铁二胺-阿利新蓝染色液,可以染色酸性黏蛋白、蛋白多糖、透明质酸等物质,可以区分硫黏蛋白和蛋白多糖。黏液HID-AB染色液主要由高铁二胺溶液,Alcian-染色液等组成。染色结果为:酸性黏蛋白(硫酸化酸性黏液物质)呈棕紫色至棕黑色羧基化酸性黏液物质(蛋白多糖、透明质酸)呈蓝色,细胞核呈红色。
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原理[1]
高铁二胺N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐和N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐均为胺盐,离解后都带阳电荷。二胺盐与硫酸化酸性粘液物质结合成复合物而被显色,该反应很慢,需加入三氯化铁作催化剂。一方面使二胺盐氧化形成棕黑色的阳离子色原,从而加快染色;另一方面使染色液的pH降至1.4,在此pH值时,切片上的羧基不能与二胺盐结合而仅是硫酸根与二胺盐起反应形成紫棕至棕黑色的复合物。其后,HID-AB(pH2.5)把羧基化的唾液酸粘液染成蓝色。这样,两种主要基团的酸性粘液物质就分别显示出来。
组成[1]
1、爱先蓝染液(pH2.5)
2、HID-A液:N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐
3、HID-B液:N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐
4、三氯化铁溶液:三氯化铁
储存条件及有效期[1]
原包装未开封试剂有效期为12个月,在有效期内的已开封试剂应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
工作液配制[1]
HID-A液20ml、HID-B液5ml、三氯化铁溶液0.75ml,混匀,临用前配制(可供5张组织片浸染使用)。
样本要求[1]
组织片充分固定和脱蜡。
主要参考资料
[1] 黏液HID-AB染色液说明书
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