植物RNA提取试剂盒

概述^[1]

本试剂盒使用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTbalb帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H₂0将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

3.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。

4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。

5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份^[1]

注意事项^[1]

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000 rpm的传统台式离心机。

2. 需要自备乙醇，研钵(可选)。

3. 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 关于DNA 的微量残留：

一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留，本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜已经清除了绝大部分的DNA 残留，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留影响不是很大，如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：

1) 选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。

3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup)，请联系我们索取具体操作说明书。

4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。

5. 关于复杂植物样品提取残留较多DNA的情况：

部分较复杂的植物样品提取时，可能残留较多DNA，可以尝试本公司的ALH036植物RNA提取试剂盒。ALH036在ALH034植物RNA提取试剂盒基础上，又独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除DNA残留，在大多数情况下，可以将DNA残留清除到紫外下观测不可见。

6. 关于特别复杂难提取植物样品提取失败或者产量低的情况：

一些特别复杂的植物样品提取，如葡萄果实，蓝靛果果实等，ALH034裂解液RLT无法提取，需选择ALH038多糖多酚/复杂植物RNA提取试剂盒。一些样品产量较低，也可以尝试ALH038多糖多酚/复杂植物RNA提取试剂盒。ALH038配有强力裂解液CLB选项，在很多情况下，可以提取复杂样品或者明显提高产量。

主要参考资料

[1] 植物RNA提取试剂盒产品说明书