6磷酸果糖激酶1抗体的应用

背景^[1-3]

6磷酸果糖激酶1抗体是用6磷酸果糖激酶1对无菌动物进行系统免疫后在其血清中分离出的免疫蛋白。6磷酸果糖激酶1抗体可以特异性结合6磷酸果糖激酶1，可以用于在6磷酸果糖激酶1ELSA试剂盒中的抗体。

检测6-磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1，PFK1)在糖酵解途径中，催化6-磷酸果糖生成1，6-二磷酸果糖(Fructosel，6bisphosphate，F-1，6-BP)，这是糖酵解途径的第二次磷酸化反应，需要ATP与Mg2+参与。6-磷酸果糖激酶1是糖酵解过程的主要限速酶,是糖酵解过程中的主要调节点。糖酵解过程中，6-磷酸果糖生成1，6-二磷酸果糖(Fructosel，6bisphosphate，F-1，6-BP)，催化此反应的酶是6-磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1，PFK1)，这是糖酵解途径的第二次磷酸化反应，需要ATP与Mg2+参与，ΔG"0=-14.2KJ/mol,反应不可逆。糖酵解过程中，6-磷酸果糖生成1，6-二磷酸果糖，催化此反应的酶是6-磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1，PFK1)，这是糖酵解途径的第二次磷酸化反应，需要ATP与Mg2+参与，ΔG"0=-14.2KJ/mol，反应不可逆。6-磷酸果糖激酶1是糖酵解过程的主要限速酶，是糖酵解过程中的主要调节点。至此，糖酵解完成了代谢的个阶段。

应用^[4][5]

用于磷酸果糖激酶1表型差异与人乳腺癌及癌旁组织糖酵解水平的相关性研究

从能量代谢的角度出发,比较人乳腺癌和癌旁组织中的糖酵解水平以及糖酵解代谢限速酶磷酸果糖激酶1的表型差异,试图寻找影响乳腺癌糖酵解代谢的可能机制,为乳腺癌治疗寻找新的靶点。采用酶学分析的方法检测不同分期乳腺癌和癌旁组织中乳酸含量和乳酸脱氢酶活性,反映糖酵解代谢的水平差异；并同时检测糖酵解代谢限速酶,己糖激酶、磷酸果糖激酶1和丙酮酸激酶的活性,初步探索糖酵解水平差异的可能原因。

采用Western-Blot技术检测磷酸果糖激酶1在乳腺癌和癌旁组织中的表达情况和表型差异,分析其对磷酸果糖激酶1活性的影响,进一步探讨糖酵解水平差异的可能原因。Western-Blot结果采用Quantity One凝胶定量软件进行灰度分析,计量资料均用平均数±标准差表示。两组均数比较采用t检验,计数资料采用χ2检验,通过线性回归分析探讨磷酸果糖激酶1表型差异与其活性的相关性,应用SPSS13.0统计软件分析实验数据,以P<0.05为有显著统计学差异。

乳腺癌组织中P亚型所占的比例随着病理分期的增加而增加,M和L亚型所占的比例随着病理分期的增加而减少。进一步的相关性分析显示,P亚型的表达与磷酸果糖激酶1的活性呈正相关,且相关性具有统计学意义(R2=0.9982,p=0.032)；M亚型的表达与磷酸果糖激酶1的活性呈负相关,但没有统计学意义(R2=0.9694,p=0.107)；L亚型的表达与活性也呈负相关,也没有统计学意义(R2=0.9274,p=0.178)。在癌旁组织中,Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期磷酸果糖激酶1M、L和P亚型之间的比例分别为8%：70%：22%,3%：71%：26%和12%：64%：24%,各病理分期之间磷酸果糖激酶1的表达没有明显的表型差异。

参考文献

[1]Targeting glycolysis in leukemia:A novel inhibitor 3-BrOP in combination with rapamycin[J].Lauren J.Akers,Wendy Fang,Alejandro G.Levy,Anna R.Franklin,Peng Huang,Patrick A.Zweidler-McKay.Leukemia Research.2011(6)

[2]Differential expression of phosphofructokinase-1 isoforms correlates with the glycolytic efficiency of breast cancer cells[J].Patricia Zancan,Mauro Sola-Penna,Cristiane Marques Furtado,Daniel Da Silva.Molecular Genetics and Metabolism.2010(4)

[3]Regulation of glucose metabolism by 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatases in cancer[J].Abdullah Yalcin,Sucheta Telang,Brian Clem,Jason Chesney.Experimental and Molecular Pathology.2009(3)

[4]The Biology of Cancer:Metabolic Reprogramming Fuels Cell Growth and Proliferation[J].Ralph J.DeBerardinis,Julian J.Lum,Georgia Hatzivassiliou,Craig B.Thompson.Cell Metabolism.2008(1)

[5]王冠楠.磷酸果糖激酶1表型差异与人乳腺癌及癌旁组织糖酵解水平的相关性研究[D].武汉大学,2012.