去氢木香内酯的制备及药理研究

发布日期:2020/3/12 14:37:13

背景及概述^[1-3]

去氢木香内酯（Dehydrocostuslactone）是一种植物倍半萜类化合物，来自于云木香（Saussurealappa）的干燥根。对去氢木香内酯药理学活性的研究表明：去氢木香内酯具有抗分支杆菌活性，也是细胞毒性T淋巴细胞的有效抑制剂。该化合物还具有抗肿瘤作用，能诱导人前列腺癌细胞DU145凋亡，增强TNF‑α诱导人白血病细胞HL60凋亡等药理学活性。

CN201110004217.6提供了去氢木香内酯新的用途，首次发现去氢木香内酯抗血管生成作用，首次发现去氢木香内酯可有效抑制血管内皮细胞的增殖、迁移和小管形成，说明去氢木香内酯具有抗血管生成活性，可作为血管生成抑制剂使用，能够作为血管生成抑制剂应用于血管生成药物的制备以治疗肿瘤、关节炎、银屑病、眼科疾病、动脉粥样硬化等新生血管依赖性和新生血管相关性疾病。

制备^[2]

选取乙酸甲酯-正丙醇-乙醇-水体系在半制备型逆流色谱仪上来分离纯化木香内酯类成分。实验条件适合温度为25℃，先按4∶0.8∶2∶6体积比将上述溶剂组分分配置于分液漏斗中，振摇后静置分层。待平衡一段时间后，将上相和下相分开。采用半制备型逆流色谱仪，配有聚四氟乙烯柱，20ml进样阀，柱容积为300ml，配有TBP-50A泵，TBD-23检测器和N2000色谱工作站。称取100mg木香粗样溶解于10ml上相和10ml下相溶液组成的溶液中待用。进样前，先用固定相充满整个柱子，调整主机转速为950rpm，以0.5ml/min的流速将流动相泵入柱内；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样，然后根据检测器紫外图谱，接收目标成分，得到木香内酯和去氢木香内酯流分，浓缩冻干后进行结晶，其HPLC纯度达到98.8％。

药理研究^[2]

蔡虹等人探讨了去氢木香内酯对慢性髓系白血病细胞系K562细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:应用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Westernblot检测相关蛋白的表达。结果:CCK-8检测结果显示,4、6、8、10、12μmol/L去氢木香内酯能够明显抑制K562细胞增殖,作用24h抑制率分别为（24.32±3.05%）、（42.91±3.89%）、（46.35±4.93%）、（77.06±5.42%）、（89.04±4.25%）,对照组为（2.08±0.27%）,差异有统计学意义（P<0.05）;5、10μmol/L去氢木香内酯能够诱导K562细胞凋亡,与对照组相比凋亡率由（2.73±0.46%）分别增加到（14.43±2.52%）、（31.71±3.58%）（P<0.05）;去氢木香内酯能够使细胞周期阻滞在G2/M期,G2/M期细胞比例由（8.53±1.71%）分别增加到（17.42±2.72）、（31.79±4.38%）（P<0.05）;去氢木香内酯能够显著抑制BCL-2、CyclinB1、CDK1、BCR/ABL、STAT5、STAT3等的表达,上调BAX、p21的表达水平。结论:去氢木香内酯通过BCR/ABL-STAT信号通路抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡。