免疫细胞无血清培养基的特点与应用

免疫细胞无血清培养基概述^[1]

免疫细胞无血清培养基可用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）的体外诱导及体外大规模扩增培养。

免疫细胞无血清培养基特点

1、无血清培养基，无添加细胞因子

2、无异源动物成分，化学成分限定培养基

3、培养性能优越，支持高密度单核细胞培养

免疫细胞无血清培养基应用

1、DC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养

2、PBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养

3、单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养

4、T淋巴细胞的长期增殖培养

免疫细胞无血清培养基使用方法^[1]

1、采集与分离外周血采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。

2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时，绷胞计数。按细胞密度2x10⁶cell/mL接种至对应体积的培养液中。添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) 1d时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。

3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。同时添加新加入培养液体积l10%比例的自体血浆。补液比例大致在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）
2) 5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x10⁶cell/mL。补液比例大致在1：3左右。
3) 7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(06-08）x10⁶cell/mL。补液比例大致在1：2左右。
4) 9d时，将剩余培养液全部加入。

4、收获细胞
培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。

主要参考文献

[1] 孙婧、陈红松、高燕、王松霞、张毅、王宇；无血清培养基与完全培养基对体外诱导免疫细胞支持作用的比较。中国肿瘤生物治疗杂志。