骨髓间充质干细胞血清型程序冻存液的特点

概述^[1]

骨髓间充质干细胞血清型程序冻存液针对骨髓间充质干细胞冻存的特殊配方，能大大降低细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤，有效提高细胞复苏率和活力。质量控制：经过了细菌、真菌、支原体检测。保存：保存于2-8°C，有效期维持三年；为了维持产品稳定性，请勿反复冻融相关产品。

特点^[1]

即用型产品，方便快捷；

复苏率更高达 90%，远超普通冻存液的70%的效率；

无需程序冻存，细胞可直接置于- 80°C冰箱完成冻存过程，省事省时；

无血清无蛋白配方，成分明确，不影响细胞的生长和分化潜能及其它高级应用；

冻存步骤^[1]

1. 选择处于对数生长期的细胞，按照常用的方法收集细胞于离心管中，按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数（参考数量：5×105 至 5×106cells/mL）。

2. 取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（考离心条件：4℃，250 g，离心3~5 min）。

3. 吸去上清液。

4. 加入适量程序冻存液于离心管中，混合均匀，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

6. 将冻存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮长期保存。

复苏

1. 从液氮中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴锅中快速解冻。

2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即逐滴加入少量细胞完全培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有8~10 mL该细胞完全培养基的试管中，轻轻混合均匀。

3. 离心收集培养细胞（参考离心条件：4℃，250 g，离心3~5 min)，吸去上清液。

4. 加入1~2 mL完全培养基重悬细胞。

5. 按照合适的接种密度将细胞接种到细胞培养容器中，加入适量的已预热的新鲜的细胞完全培养基。

6. 轻轻摇晃培养器皿，使细胞分布均匀。

7. 镜检后放置于37℃ ，5% CO2，饱和湿度的培养箱中继续培养。

主要参考文献

[1] 佟明华；雷香丽；王亚萍；孔祥平；罗显荣。大鼠骨髓间充质干细胞的纯化、冻存及成瘤性分析。中国组织工程研究。