MS基本培养基的应用

背景及概述^[1][2]

MS基本培养基是只含有无机盐、蔗糖、维生素和水等最基本成分的合成培养基。如Ms、White、Nitsch、N6等培养基。菊叶薯蓣选用MS基本培养基，它的显著特点是含有很高的氮、钾，尤其是硝酸盐的用量很大，同时含有的铵盐，使它营养丰富，能支持培养物快速生长，当培养物久不转接时仍可维持其生存。

应用^[3-6]

MS基本培养基对筛选营养缺陷型微生物和进行遗传、育种等研究工作十分重要，其应用举例如下：

1）用于一种红果参离体外繁方法，首先进行愈伤组织诱导，将消毒灭菌处理后红果参外植体接种于MS基本培养基A中培养后有愈伤组织出现，将愈伤组织切割转接至MS基本培养基B中培养，愈伤组织不断增殖，且表面分化出丛生芽，将丛生芽切割转接至MS基本培养基C中；将丛生芽按40d的生长周期轮流接入MS基本培养基B与MS基本培养基C，作为红果参丛生芽分化和增殖的培养方式，反复继代增殖3～4代，得到种苗；取种苗中高3?4cm的健壮主苗接种于MS基本培养基D中培养获得苗壮根粗的生根苗；取生根苗置于室温下炼苗移栽至消毒后的腐殖质中保温保湿培养，生长30d后，即得生根移栽苗。本发明的有益效果是红果参繁殖方法成本低、繁殖周期短、质量和成活率高。

2）用于铁皮石斛快速繁殖，包括外植体清洗消毒；外植体接种于不定芽诱导培养基：MS基本培养基、6-BA2.0mg/L-3.0mg/L、NAA0.2mg/L；不定芽茎段接种于原球茎诱导培养基：B5基本培养基、NAA2.0mg/L、6-BA0.2mg/L、KT0.5mg/L-2.0mg/L；原球茎转接于原球茎增殖培养基：1/2MS基本培养基、椰汁50g/L；原球茎转接入分化培养基：1/2MS基本培养基、NAA0.2mg/L、马铃薯浸提物80-100g/L；将分化苗接种于壮苗生根培养基：1/2MS基本培养基、香蕉浸提物100-150g/L。本发明提高铁皮石斛组培苗成活率，植株健壮。

3）用于花叶玉簪植物组织培养基配制，涉及一种植物组织培养技术。该配制方法采用组织培养技术，通过改变激素配比使其适应花叶玉簪的生长发育，其配方由分化培养基及生根培养基组成，分化培养基是在MS基本培养基中加入6-苄氨基嘌呤、1-萘乙酸两种激素，生根培养基是在MS基本培养基中加入1-萘乙酸，两种培养基分别配制、配套应用，分化培养基配方：基本培养基MS、6-苄氨基嘌呤、1-萘乙酸、蔗糖、琼脂粉；生根培养基配方：基本培养基MS、蔗糖、琼脂粉；通过分化培养基配方的制备和生根培养基配方的制备，获得两种培养基。采用本发明可使培养周期缩短至30天左右，分化倍数在5-6之间，且没有变异，苗子整齐度高；接种40天后，生根率达90-93%，单苗生根条数在4-8之间。

4）用于一种西兰花离体细胞快速增殖，该方法包括以下步骤：⑴制备MS基本培养基；⑵西兰花离体细胞获得及接种方法：将当年西兰花种子冲洗消毒后得到无菌种子；无菌种子接种于MS基本培养基上，培养14d后得到无菌苗；切取胚芽并以正面朝上接种到MS诱导培养基上，于黑暗、温度为24~26℃条件下脱分化培养30d即得西兰花离体细胞；⑶西兰花离体细胞增殖方法：将西兰花离体细胞接种于MS增殖培养基上，于黑暗、温度为24~26℃条件下培养15~20d即可。本发明方法简便、快捷，可以定向调控离体细胞的快速增殖与发育，提高细胞的增殖速率，从而摆脱西兰花自然生长规律，缩短繁殖周期。

制备^[2]

配制MS基本培养基是日常工作，为简便操作，可将配方中的药品一次称量后供一段时间使用，这种储备液，按药品种类和性质分别配制保存：

一般大量元素使用浓度需稀释约10～100倍，微量元素等需稀释约200～1000倍。要注意过高的浓度和不恰当的混合配液会起沉淀，影响培养基效果。一般应按表列顺序依次称量，分别溶解在少量蒸馏水中，最后再依次加到一起，并定容到规定的体积。配制培养基用不锈钢锅，首先应在锅里加入蒸馏水(蒸馏水可排除水中的钠离子等杂质对植物生长时的影响)。再放入琼脂和糖，琼脂充分溶解后加入储备液1、2、3、4植物激素。加蒸馏水到需要的体积，充分混合好以后用0.1molKOH或0.1molHCl调整pH值，菊叶薯蓣培养基pH值应调整到6～6.4，然后装瓶灭菌。灭菌时间一般应在20分钟，时间过长易破坏培养基中的营养成分及植物激素，影响植物生长。

主要参考资料

[1]作物育种与良种繁育学词典