醋酸西曲瑞克的制备

背景及概述^[1][2]

醋酸西曲瑞克是一种合成的十肽，主要应用于辅助生育技术，对控制性卵巢刺激的患者，防止提前排卵，醋酸西曲瑞克又常称为西曲瑞克，西曲瑞克是促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂，能与内源性LHRH竞争性地结合垂体细胞膜上的受体，从而抑制垂体分泌黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)呈剂量依赖性。

制备^[1-2]

方法1：一种纯化醋酸西曲瑞克的方法，包括如下步骤：

步骤1、树脂处理：醋酸根型的阴离子树脂经0.1mol/L的醋酸溶液浸泡，过滤收集树脂；

步骤2、转盐：1g西曲瑞克粗品加100ml水溶解，加入步骤1的醋酸根型的阴离子树脂10g，在温度为25℃的条件下搅拌0.5h，控制溶液的pH为2.5，过滤收集滤液。

步骤3、纯化：粒径为3μm，孔径为120A°的反相C18柱用流动相平衡，所述流动相A为水溶液，所述流动相B为乙腈溶液，所述流动相A和所述流动相B均加入质量百分数为0.5％醋酸溶液，步骤2收集的滤液上样，进行线性梯度洗脱，流动相B％的变化率为0.1％/min，检测波长220nm，分段收集洗脱液，直接冻干后获得粉末状醋酸西曲瑞克纯品20mg，收率为40％，纯度达到99.193％。

方法2：醋酸西曲瑞克的制备方法，包括固相多肽合成法制备西曲瑞克树脂，西曲瑞克树脂切割沉降后得到西曲瑞克粗品，西曲瑞克粗品纯化、转盐冻干后得到醋酸西曲瑞克纯品；

(1)以氨基树脂为起始树脂载体，通过固相合成法依次连接西曲瑞克氨基酸序列中相对应的Fmoc-保护氨基酸，得到西曲瑞克前体肽I-氨基树脂如下：

Fmoc-D-Nal-D-Cpa-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-氨基树脂

(2)脱掉D-Nal保护基，进行N端乙酰化反应，得到两曲瑞克前体肽II-氨基树脂如下：

Ac-D-Nal-D-Cpa-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-氨基树脂

(3)切割、沉降后，得到西曲瑞克粗肽III：由于收到的粗品中含有大量的TFA盐和部分切割试剂，为了更好的计算粗品的得率，本发明采用C18(20*250mm)色谱柱进行除盐步骤。样品完全溶解后过滤，以9ml/min的流速(流动相：A0.1％乙酸/水，B0.1％乙酸/乙腈)在214nm下按照如下程序进样分析：收集样品峰溶液，冻干后称重得样品为70.1mg，根据粗品的量和合成测定实际取代度(SD=0.33mmol/g)计算的理论量，计算粗品收率达到92.7％，比现有技术仅60％的收率有大幅度成倍的提高。

(4)纯化、转盐及冻干得到醋酸西曲瑞克IV。将西曲瑞克粗品III溶于乙酸/乙腈/水中，经反相高效液相色谱法纯化得到西曲瑞克多肽，制备条件为：C18制备柱，流动相为A(0.1％乙酸/水)/B(0.1％乙酸/乙腈)，流速9ml/min，检测波长210nm；将纯化、冻干后的西曲瑞克多肽用1％醋酸溶解，采用强阴离子交换树脂室温搅拌吸附1h，之后将吸附液补加醋酸含量到5％，经冻干、称量得到醋酸西曲瑞克纯品23.3mg，纯度达到99.631％，纯品收率为30.8％；分别称取转盐前后的西曲瑞克多肽各1mg，按药典方法测定醋酸含量，转盐前醋酸含量为1.73％，转盐后醋酸含量为6.8％，符合药典要求(醋酸含量在4％～8％)，目标物醋酸西曲瑞克产品合格。

药理作用^[3]

本品是一种促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂。本品与内源性GnRH竞争垂体细胞上的受体，从而抑制内源性黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)的释放，推迟LH峰的出现，从而控制排卵。本品的作用是剂量依赖性的，抑制作用是直接的，并通过连续的治疗来维持，不引起黄体激素受体活性在初始时高涨随后下调。

适应证^[3]

1.用于在接受控制性超排卵辅助生殖治疗的妇女，防止过早出现的LH峰及控制随后的排卵。

2.子宫内膜异位症。

主要参考资料

[1] CN201711299105.1一种纯化醋酸西曲瑞克的方法

[2] CN201310305700.7以RinkAmide-AMResin为载体制备醋酸西曲瑞克的方法

[3] 新编临床药物学