人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒的实验原理

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒概述^[1]

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人血管紧张素原（AGT）的含量。

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断。

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒实验原理^[1]

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人血管紧张素原（AGT）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血管紧张素原（AGT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

人血管紧张素原(AGT)ELISA试剂盒样本处理及要求^[1]

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

主要参考文献

[1] 章晓燕；吕文律；滕杰；钟一红；丁小强。慢性肾脏病患者尿血管紧张素原与肾脏肾素血管紧张素系统活性的相关性。中华肾脏病杂志。