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真核基因转染主要方法

发布日期:2020/2/4 9:10:12

真核基因转染概述[1]

通过非病毒方法将核酸引入真核细胞的过程定义为转染。使用各种化学,脂质或物理方法,该基因转移技术是在细胞背景下研究基因功能和蛋白质表达的有力工具。将外源物质导入细胞的方法主要包括脂质体转染(瞬时转染和稳定转染),电转或者病毒感染。病毒载体是进行真核细胞基因工程、真核基因转染的有力工具。

真核基因转染主要方法介绍[1]

病毒载体介导的真核基因转染,是将需要转移的外源DNA插入病毒 DNA或 RNA中,借助病毒的侵染机制将其携带进入体细胞,并整合入体细胞基因组中。至于RNA病毒 ,则可通过逆转录酶的作用产生cDNA克隆.进而用来感染机体。通常采用的逆转录病毒载体当属典型代表,并且应用最广。植物病毒载体在基因转移中也有独到用途。就病毒基因转移体而言,由于病毒基因组结构简单,分子背景比较清楚,易于改造和操作,转染率高,有较高的靶细胞特异性,这些都是其它载体系统所无法比拟的,故在真核细胞基因转移载体,尤其是在以基因治疗为目的的载体系统中,它就显得格外令人关注。迄今,不论在体内还是体外,均以逆转录病毒载体在具有分裂功能的细胞中进行基因转移和表达最为成功。

主要参考文献

[1] 张德礼,朱关福。病毒基因转移载体——真核基因工程的工具。《生物学教学》 1996年第6期 1-4,共4页。

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