16HBE人支气管上皮样细胞的应用

背景^[1]

16HBE人支气管上皮样细胞来源于一正常人的支气管上皮组织。后经Ad12SV40病毒感染并克隆。该细胞可用于检测化学和生物制剂的致癌作用。

保存方法^[1]

冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
迄今为止，公司收录背景资料清晰，细胞活力状态良好的细胞株1420株，其中绝大部分是近年来从美国ATCC和NIH分批引进的细胞种子，少部分来自全国各地细胞研究所，细胞来源可靠，背景资料清晰，代数年轻，活力好。

注意事项^[1]

1）操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。
2）点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。
3）操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。
4）不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。
5）瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。
6）吸溶液的吸管等不能混用

细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

应用^[1]

苯并(a)芘染毒致人支气管上皮细胞和上皮样成纤维细胞周期的变化

目的观察苯并（a）芘（BaP）染毒对人支气管上皮细胞（16HBE）和上皮样肺成纤维细胞（W138）细胞周期影响的剂量效应和时间效应。方法 BaP 0,1,2,4,8,16和32μmol·L-1染毒16HBE和W138细胞24 h,BaP 16μmol.L-1染毒16HBE和W138不同时点（0,1,2,4,8,12和24 h）,BaP 16μmol.L-1染毒16HBE和W138 

参考文献

[1]苯并(a)芘染毒致人支气管上皮细胞和上皮样成纤维细胞周期的变化  陈文涛范燕峰张慧涛杨瑾山西医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室