夏天无提取物的药理作用

背景及概述^[1-2]

夏天无系罂粟科植物伏生紫堇Corydalisdecumbens(Thunb.)Pers.的干燥块茎。上世纪六十年代，江西天施康中药股份有限公司(原江西余江制药厂)从民间发掘出夏天无，对其生物学特性、栽培技术、化学成分、药理作用、毒性反应、临床应用进行了系统的研究，并相继研制出夏天无系列制剂。随着科学技术发展和现代分析技术的应用，对夏天无的研究得以进一步深入，从夏天无植物中分离出原阿片碱、紫堇米定碱、延胡索乙素、毕扣扣灵、巴马汀、小檗碱等20多种生物碱。传统的夏天无总生物碱提取工艺以稀盐酸提取，通过阳离子交换树脂吸附纯化，用氨水的乙醇溶液回流洗脱，回收乙醇，得夏天无提取物。该工艺提取的夏天无总生物碱纯度较低，较多的杂质使制剂的稳定性差，通常多用于制备口服固体制剂。

化学成分^[2]

夏天无主要含生物碱类成分，总生物碱含量为1.71%-2.88%[1]。迄今为止已从夏天无中分离到30多种生物碱，多属于苄基异喹啉类，包括四氢巴马汀（tetrahydropalmatine，1）、斯阔任碱（（-）-scoulerine，2）、紫堇碱（（+）-corydaline，3）、紫堇尔明（（+）-kikemanine，4）、四氢药根碱（R-（+）-corypalmine，5）、药根碱（jatrorrhizine，6）、小糪碱（berberin，7）、巴马汀（palmatine，8）、二氢巴马汀（dihydropalmatine，9）、普鲁托品（protopine，10）、α-别隐品碱（allocryptopine，11）、隐品碱（cryptopine，12）、隐品巴马汀（muramine，13）、毕枯枯灵（bicuculline，14）、咖若定（（-）-capnoidine，15）、紫堇明定（（+）-corlumidine，16）、夏无碱（decumbenine，17）、（+）-humosineA（18）、苏元胡碱A（（-）-humosineA，19）、夏无宁碱（（+）-egenine，20）、（-）-corydecumbine（21）、epi-α-decumbensine（22）、decumbensine（23）、蝙蝠葛碱（menisperine，24）、球紫堇碱（（+）-bulbocapnine，25）、毛茛宁碱（26）、3，4-去氢白毛茛宁碱（27）、bitetrahydro-isoquinoline（28）、isoquinoliniumA（29）、isoquinoliniumB（30）、decumbenineB（31）、decumbenineC（32）、二氢血根碱（dehydrosanguinarine，33）和罂粟碱（papaverine，34）。详见图。

药理作用^[2]

1. 抗心脑血管系统疾病

1)抗老年性痴呆

夏天无总生物碱能明显改善血管性痴呆大鼠模型的学习、记忆能力，有效地降低模型大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，AChE）的含量，提高大脑皮层总抗氧化能力，减轻自由基的损伤；提高由东莨菪碱及D-半乳糖造成的2种学习记忆获得障碍大鼠的学习记忆能力；可改善喹啉酸损毁海马造成的痴呆大鼠学习记忆功能障碍，抑制脑内AChE活性，提高乙酰胆碱含量，增强中枢胆碱能系统功能；可显著增加D-半乳糖诱导的痴呆大鼠脑内5-羟色胺和多巴胺递质的含量。通过体外抗AChE活性实验，比较了四氢掌叶防己碱、原阿片碱、比枯枯灵碱、1-斯库来碱和去氢紫堇碱5种生物碱，发现原阿片碱的体外抗AChE活性作用最强，表明原阿片碱可能为夏天无总生物碱抗AChE活性的主要有效成分之一。

2)抗脑缺血

夏天无总碱对脑缺血/再灌注损伤有保护作用，可抑制一氧化氮合酶活性、提高超氧化物歧化酶（SuperoxideDismutase，SOD）活性、减少神经细胞脂质过氧化损伤和抑制神经细胞凋亡。研究发现，夏天无注射液含生物碱类成分可降低小鼠脑缺血脑组织内AchE活性，保护神经元、抗神经元凋亡；增加脑缺血再灌注大鼠海马内血管生成素-2、血管内皮细胞生长因子表达，而对海马细胞间黏附分子-1的水平无影响。另有研究表明，夏天无能降低脑梗死模型大鼠的循环内皮细胞数量和血清髓鞘碱性蛋白浓度；促进大鼠脑梗死模型脑组织神经干细胞增殖和突触素的表达，增强脑梗死大鼠大脑可塑性。

3)抗心律失常

心律失常的发生与心肌电生理密切相关。一些心律失常易感因素可通过影响钠钾钙等离子通道功能，引起离子通道间平衡失调，心肌电信号传导紊乱，诱发心律失常的发生。hERG钾通道是抗心律失常药作用的重要靶点。研究发现，夏天无中别隐品碱可阻断HEK293细胞表达的hERG钾离子通道，能显著抑制中后期动作电位，对早期动作电位没有影响。乌头碱、氯仿、肾上腺等引起的心律失常均与心肌细胞内Na+浓度增加有关。别隐品碱能明显降低氯仿诱发豚鼠室颤率，降低肾上腺素致豚鼠心律失常的持续时间，并对乌头碱诱发的大鼠心室乳头肌收缩节律失常有明显拮抗效应。另外，别隐品碱可抵抗由氯化钙-肾上腺素诱发的细胞膜内钙离子内流增加所产生的心律失常。另有研究表明，别隐品碱增加心室肌细胞L-型钙电流（ICa-L），增大窗电流。ICa-L参与构成心肌细胞动作电位的2期平台期，ICa-L增大，会延长平台期并延长动作电位时（ActionPotentialDuration，APD），而延长APD20、APD50可能延长有效不应期（ERP），2相折返性心律失常占据心律失常的一大部分，延长ERP可以有效终止和预折返性机制的心律失常。

4)抑制血小板聚集

血小板的活化、聚集在心脑血管发病过程中起了非常重要的作用。近年来研究发现，不但凝血酶、肾上腺素等物质可导致血小板活化，而且异常情况下的血流高剪切应力也可以诱导血小板聚集（SIPA），而SIPA不能被阿司匹林等常规的抗血小板药物所抑制。研究夏天无总碱能够有效地抑制由剪切力诱导的血小板聚集，抑制体内、外对以二磷酸腺苷和花生四烯酸诱导的血小板聚集，说明夏天无总碱是一个有效的多途径血小板聚集抑制剂。

5)降血压

研究表明，原阿托品静注（1mg·L-1和2mg·L-1），可通过舒张血管平滑肌，降低外周阻力，降低血压，使肾性高血压大鼠的收缩压和舒张压明显下降。而口服剂量在10-40mg·L-1范围内，对血压无明显影响。

2. 保肝

研究表明，给药24h后，原阿片碱25μmol·L-1及别隐品碱10μmol·L-1可显著增加人肝细胞和HepG2细胞内细胞色素氧化酶P4501A的mRNA水平，但其作用明显低于2，3，7，8-四氯二苯并-P-二恶英（TCDD）；与TCDD作用相反，原阿片碱、别隐品碱只增强P4501A的mRNA水平，而不会抬高P4501A蛋白量或者活力水平。

研究延胡索乙素保肝作用与抗氧化有关，能明显降低肝损伤小鼠的血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶和肝匀浆肝脏丙二醛含量，肝匀浆SOD活性提高，肝组织变性明显减轻，肝组织结构完好。

3. 镇痛

夏天无药材磨粉灌胃给药，对醋酸所致小鼠扭体反应有明显的抑制作用，能明显提高小鼠热板痛阈值。夏天无超微粉碎提高了生物利用度，其抗镇痛作用更强。背根节神经元是初级感受神经元，在受到损伤或炎症影响下，其兴奋性往往异常升高，成为慢性痛信号的“起搏点”。研究延胡索乙素通过抑制大鼠慢性压迫背根节神经元自发放电，从而对慢性腰背痛有镇痛作用。

4. 抗炎

夏天无注射液对对二甲苯所致的小鼠耳壳炎症反应的多种环节，如炎性渗出、炎性介质的释放以及炎症后期的肉芽组织增生等均有影响，从而降低了炎症反应的症状；对急性慢性炎症均呈现抑制作用，具有抗炎效应。复方夏天无片是中医学治疗类风湿关节炎的重要药物之一，其作用机制具有抗炎作用，对帮助减缓患者的炎症反应，尽快恢复功能状态确有一定的帮助。

5. 其他

夏天无还具有抗抑郁作用；抑制气管平滑肌收缩，产生平喘效果；增强损伤坐骨神经的整合素β1的表达等作用。

药代动力学^[2]

考察夏天无提取物中有效成分原阿片碱和延胡索乙素的大鼠肠吸收特性，结果表明原阿片碱和延胡索乙素在回肠吸收较好，原阿片碱的吸收在十二指肠、空肠和回肠可能存在饱和现象。给药体系pH由7.4降低到5.4时，原阿片碱和延胡索乙素在各肠段的吸收均呈降低的趋势。这是由于有效成分原阿片碱和延胡索乙素二者均为叔胺类生物碱，当供试品溶液pH降低时，使二者离子型百分比逐渐升高，可能影响其在小肠的吸收，导致表观渗透系数呈现降低的趋势。研究也证明，不同pH环境对延胡索乙素在大鼠小肠内吸收有一定的影响，延胡索乙素在大鼠小肠内的吸收主要是以被动转运方式进行。比较了从夏天无中提取的4种生物碱在3种不同配方中药代动力学和生物利用度。这4种生物碱分别为原阿片碱（protopine）、四氢巴马汀（tetrahydropalmatine）、毕枯枯灵（bicuculline）和夏无宁碱（egenine），3种不同介质分别为超临界萃取生物碱提取物（CDAS-SFE）、超临界萃取生物碱提取物盐酸冻干品（CDAs-SFE/HCl）和超临界萃取生物碱提取物β-环糊精包合物（CDAs-SFE/HPβCD）。结果表明，CDAs-SFE/HCl中生物有效成分原阿片碱及四氢巴马汀的Cmax、AUC，生物利用度显著高于CDAS-SFE及CDAs-SFE/HPβCD；而CDAs-SFE/HPβCD中的毒性成分毕枯枯林的AUC及生物利用度明显高于CDAS-SFE及CDAs-SFE/HCl中的。以上结果说明在盐酸介质中夏天无的生物活性成分能有更好的生物利用度，而毒性成分生物利用度较低。

临床作用^[2]

1. 治疗关节炎

采用夏天无片剂治疗类风湿性关节炎43例，结果显效25例，有效16例，无效2例，有效率95.3%。采用复方夏天无联合甲氨喋呤治疗类风湿关节炎，提高甲氨喋呤疗效并减少甲氨喋呤肝损伤，骨髓抑制等不良反应。夏天无片治疗200例腰肌筋膜炎有效率90%，与布洛芬片治疗组（有效率76%）有显著差异。通过对60例患者的临床观察，采用复方夏天无片对骨性关节炎的休息痛、活动痛、压痛肿胀有明显疗效（治疗率95.2%），与布洛芬（91.2%）比较，效果相同但无明显副作用。

2. 治疗颈型颈椎病

采用复方夏天无片治疗30例门诊确诊为颈型颈椎病患者，根据疗效判定标准，其中临床治愈12例，显效10例，有效5例，无效3例。

3. 治疗癌性疼痛、坐骨神经痛和关节痛

复方夏天无片配合化疗治疗30例癌性疼痛，其中完全缓解4例，部分缓解13例，轻度缓解7例，无效6例，总有效率56%，与单纯化疗组（有效率30%）相比，复方夏天无配合化疗止痛效果明显]。采用夏天无注射液进行穴位注射治疗坐骨神经痛48例，总有效率87.50%，对照组总有效73.33%，从显效率看，治疗组优于对照组，表明夏天无对坐骨神经痛确有较好的疗效，夏天无注射液穴位注射，既有针灸激发经络功能的作用，又发挥了夏天无通络止痛的药理作用，故疗效较好。此外在治疗三叉神经痛、关节痛、偏头痛等都有很好的疗效。

3. 治疗缺血性脑血管病

临床观察表明，夏天无片治疗老年人缺血性脑血管病有效率93.3%，与血塞通软胶囊治疗组（有效率96.7%）效果相当。通过临床使用观察和实验室检测血流指标发现，复方夏天无片能显著降低血液流变指标和大脑中动脉血液流速有关指标；在血压和血糖控制平稳的情况下，复方夏天无在治疗缺血性脑血管疾病疗效明显。

4. 治疗心律失常

将89例房性或室性早搏患者随机分为治疗组46例和对照组43例，治疗1个疗程后，比较复方夏天无片治疗组与心律平对照组的临床症状、动态心电图疗效及不良反应情况。结果是2组总有效率无显著性差异，不良反应率治疗组较低，2组比较有显著性差异（P<0.05）。说明复方夏天无片和心律平的抗心律失常疗效相似，复方夏天无片较心律平更安全。

5. 其他

夏天无相关制剂还可治疗近视眼、椎一基底动脉供血不足等疾病。

制备^[1]

取夏天无药材1000g，打碎，过10目筛，加1.0％(v/v)稀盐酸浸渍48小时后以每分钟1-3ml的速度渗漉，收集渗漉液，至渗漉液生物碱反应呈阴性为止。加10％(g/v)氢氧化钠溶液调PH值至7，过AB-8型大孔吸附树脂柱，至流出液呈生物碱反应呈阳性止。依次用水、40％(v/v)乙醇洗至颜色变淡，再用95％(v/v)乙醇洗脱，直到洗出液呈生物碱阴性反应为止，收集95％乙醇洗脱液，过氧化铝层析柱，收集流出液并减压回收乙醇，在浸膏中加1.0％(v/v)稀盐酸调节PH至2-3条件下溶解，然后再次用10％氢氧化钠溶液调PH至9.0析出生物碱，过滤，沉淀物减压低温干燥，即得夏天无提取物。

主要参考资料

[1] 夏天无提取物基本理化性质研究*

[2] 夏天无的研究进展

[3] CN200610124689.4一种夏天无提取物的制备工艺及其新用途