舒尼替尼的制备方法

背景及概述^[1]

舒尼替尼(Sunitinib、SU011248、Sutent)是一种多靶点的生物靶向抗肿瘤药物，能同时抑制多条信号传导通路，具有抗肿瘤和抗血管生成作用。舒尼替尼在肾细胞癌(renalcellcarcinoma，RCC)和胃肠间质瘤(gastrointestinalstromaltumor，GIST)的临床前和临床研究中均显示出了确切的抗肿瘤效应。2006年1月美国食品和药品管理局(FDA)正式批准了舒尼替尼用于治疗上述两种肿瘤。此外，舒尼替尼在其他实体瘤的研究中也显示出了一定的作用。

作用机制及临床前研究^[1]

受体酪氨酸激酶(RTKs)在一系列细胞生长周期(例如细胞生长、分化和死亡)的信号转导途径中起重要的作用。很多类型的肿瘤因为存在RTKs功能紊乱，而诱导肿瘤细胞生长、增殖及分化。血管内皮生长因子受体1、2、3(VEGFR-1，2，3)具有酪氨酸激酶活性，能激活细胞内信号通路，最终引起肿瘤血管生成。血小板衍生生长因子受体α和β(PDGFR-α，β)在很多肿瘤中均有过度表达。在肿瘤增殖过程中，PDGFR上调，刺激内皮细胞周围的间质细胞和成纤维细胞的生长和增殖。舒尼替尼可以同时阻断VEGFR和PDGFR信号转导通路，从而达到更强的抗血管生成作用。此外，舒尼替尼还可以抑制其他RTKs，如碱性成纤维细胞因子(bFGF)、胎肝激酶3(Flt3)和干细胞因子受体(c-Kit)等。研究发现，同时阻断VEGFR、PDGFR及其他多种酪氨酸激酶的活性比单独阻断一种酪氨酸蛋白激酶的抗肿瘤效果更强。

在临床前研究中，舒尼替尼在很多细胞株和动物移植瘤模型中表现出抑制肿瘤生长和增殖的作用。在对HT-29和Colo205结肠癌、NCI-H226非小细胞肺癌、WM-266-4黑色素瘤、786-0肾细胞癌、A431表皮样癌移植瘤动物模型的研究中，每日给药一次能使肿瘤消退，而且不产生耐药现象。在移植瘤动物模型中，舒尼替尼联合多西紫杉醇、氟尿嘧啶或阿霉素等化疗药物用于乳腺癌的移植瘤动物模型，或舒尼替尼联合顺铂用于小细胞肺癌，均能观察到相加或协同的治疗作用，而且受试动物的耐受性良好，死亡率小，体重无减轻。对这种联合用药作用机制的研究表明，主要是通过抑制存在于肿瘤、间质和内皮细胞内代偿性激活的促存活信号通路，从而诱导肿瘤细胞死亡而实现的。

药代动力学研究^[1]

药物代谢动力学数据主要来自于健康志愿者和一些晚期的癌症患者，其中还包括RCC和GIST患者的临床研究。在晚期肿瘤患者中，舒尼替尼50mg/d连续口服28天。第1天，舒尼替尼及其代谢产物SU012662的平均血药浓度(Cmax)分别为27.7ng/ml和4.12ng/ml，中位达峰时间约5h。0～24h的平均血药浓度-时间曲线下面积(AUC0～24)分别为420ng·h/ml和63.6ng·h/ml。第28天的平均Cmax分别为72.2ng/ml和33.7ng/ml，达峰时间分别为8.5h和6.5h，AUC0～24分别为1296ng·h/ml和592ng·h/ml。舒尼替尼及SU012662的血浆蛋白结合率分别为95%和90%，舒尼替尼的表观分布容积大约为2230L，肌酐清除率34～64L/h，平均消除半衰期(t1/2)为50h，代谢产物的t1/2为95h。食物不影响舒尼替尼的生物利用率和活性代谢产物暴露率。舒尼替尼在健康志愿者和肿瘤患者的药代动力学特征无明显差异。

舒尼替尼主要通过P450-3A4(CYP3A4)代谢，产生的活性代谢产物SU012662占总暴露率的23%～27%。给药剂量的61%以原形药经粪便排出，16%通过肾清除。舒尼替尼的药代动力学不受肿瘤类型、年龄、性别或体重影响。至今仍无肝肾功能损害患者及儿童运用舒尼替尼的药代动力学参数。

用法和注意事项^[2]

每日1次，每次50mg口服，用4周停2周。6周为一周期。逐渐调整剂量至12.5mg/d。同用强效细胞色素酶P450抑制剂时应减量，同用强效细胞色素酶P450诱导剂时应加量。

不良反应、禁忌和药物影响^[2]

常见骨髓抑制和淋巴细胞减少、腹泻，恶心，呕吐，消化不良，厌食和腹痛、乏力、口腔炎和味觉改变、皮肤脱色、高血压。重度骨髓抑制和静脉血栓栓塞、脱发不常见，偶见皮疹和手足综合征、出血、虚弱、头痛、关节痛、肌痛、口腔痛和背痛、咳嗽和呼吸困难、充血性心力衰竭、肝酶和胰酶升高及其他肝功能异常、轻度肾功能异常和电解质紊乱、甲状腺功能低下、水肿。罕见致命性胃肠道并发症包括穿孔。可能导致肾上腺功能不全。

制剂规格^[2]

片剂：12.5mg/片，25mg/片，50mg/片。

制备^[3]

1)2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酸的合成实施例

向往装有温度计、磁子的100mL三颈瓶中加入6.0mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-羧酸乙酯以及6mL甲醇，溶解后加入含有1.2g氢氧化钠、浓度为3mol/L的氢氧化钠水溶液，接着在氮气的保护下回流反应4.5h，反应结束后向得到的反应液中倾入20mL冰水中，然后将形成的冰水溶液转入分液漏斗中，再向其中加入12mL二氯甲烷，进行次萃取，收集次萃取所得的有机相，并对有机相进行萃取直到有机相无紫外吸收，合并萃取有机相得到的水相，用2mol/L盐酸调节pH值至2，接着抽滤，滤饼水洗并真空干燥，得0.91g黄色固体2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酸，产率91％，m.p.>220℃。EIMSm/z(％)：167.1([M]+，100)，138.1(20)，121.1(60)；

2)往装有温度计、磁子的250mL三颈瓶中加入32.7mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酸以及13.1mL无水DMF，然后利用冰盐浴冷却至0℃，接着在搅拌下滴加49.0mmol环己基碳二酰亚胺的二氯甲烷溶液并控制反应温度在0℃，滴加完毕后加入1.65g4-二甲氨基吡啶和35.9mmolN，N-二乙基乙二胺并于室温下反应，用TLC检测反应过程完全，TLC监测所采用的展开剂是体积比为5：1的氯仿和甲醇的混合溶剂，反应59h时，TLC监测发现反应完全，反应完成后，将得到的反应液抽滤，向滤液中加水和二氯甲烷进行次萃取(3次)，收集次萃取的有机相并用65.7mL的饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，然后抽滤，所得滤液浓缩以除去溶剂形成固体，将固体用少量的二氯甲烷溶解，接着用1000mL质量浓度为5％的柠檬酸水溶液进行第二次萃取(3次)，用TLC显示有机相中不含产物，分析原因是N-(2-二乙胺基乙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺显弱碱性，与柠檬酸反应成盐而进入水相，因此收集第二次萃取的水相，然后用大量的碳酸氢钠饱和溶液以及氢氧化钠饱和溶液对其进行中和，并将酸碱度调至pH值＝8，接着用大量的二氯甲烷对上述水溶液进行第三次萃取，收集第三次萃取的有机相，将第三次萃取的有机相浓缩得红棕色油状液体，最后柱层析，得到黄色固体N-(2-二乙胺基乙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺(8.11g)，且柱层析所采用的洗脱剂体系按照洗脱顺序依次是：体积比为3：1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂、体积比为1：1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂。产率86.3％.

3)往装有回流冷凝管、磁子的50mL圆底烧瓶中加入1.89mmolN-(2-二乙胺基乙基)-2，4-二甲基-5-甲酰基-1H-吡咯-3-甲酰胺、2.08mmol5-氟-1，3-二氢吲哚-2-酮以及8mL甲苯，使其完全溶解，再加入15滴作为催化剂的哌啶(20滴为1mL)，搅拌均匀，然后加热回流3h，最后冰浴中冷却，抽滤，抽滤所得的滤饼用石油醚洗涤、干燥得0.73g橙黄色的固体舒尼替尼，产率97.3％，m.p.222-223℃(文献：收率90％，m.p.195-197℃)。

主要参考资料

[1] 多靶点酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼的研究进展

[2] 常用新药精汇手册

[3] CN201410235616.7 一种舒尼替尼的制备方法