莽草毒素的检测

背景及概述^[1]

八角茴香为木兰科植物八角茴香( Illicium verum hook.f.) 的果实，有温阳，散寒，理气等功效，用于治疗寒疝腹痛、肾虚腰痛、脘腹冷痛等病症，民间常用作烹饪调料。由于同属植物果实的形态相似，八角茴香有许多伪品，如红茴香、莽草、野八角等，有的具有毒性，误用会引起中毒，特别是日本莽草( Illicium anisatum L.) 毒性较大。同属多种植物中曾分离出莽草毒素( Anisatin) 、新莽草毒素( Neoanisatin)和伪莽草毒素( Pseudoanisatin) 等倍半萜内酯类成分，并证实莽草毒素为γ-氨基丁酸受体非竞争性拮抗剂，小鼠腹腔注射可引起惊厥、死亡，LD50为0.76 mg/kg 体重。

饮用八角茴香茶引起的中毒事件在欧美国家也时有报道。为了控制八角茴香品质和鉴别伪品，可采用热解析-气质联用法测定挥发油特征成分，采用荧光显微镜和扫描电镜进行显微结构鉴别，采用PCR 技术分析核酸片段，采用薄层层析法对植物中黄酮类和酸性成分进行分析，结合液相色谱串联质谱联用法测定莽草毒素。上述方法中，仅LC-MS /MS 方法可对引起中毒的主要成分莽草毒素进行定量测定。

检测^[1]

超高效液相色谱三重四极杆质谱法检测血浆、尿液、呕吐物和药材中八角属植物有毒倍半萜内酯标志物莽草毒素的检测方法。血浆样品经多重机制杂质吸附萃取净化柱萃取，尿液样品经硅藻土柱吸附叔丁基甲醚萃取、植物样品经叔丁基甲醚液液萃取，以水和甲醇为流动相进行梯度洗脱，在UPLC BEH C18柱上实现分离，采用负离子ESI-MS /MS MRM 方式检测。一次进样分析时间为5 min。血浆和尿液中的平均加标回收率分别为92.6%～100.3%和101%～118%； 相对标准偏差分别为3.8%～11% 和6.4%～17% ( n =6) ； 定量限( S /N = 10) 分别为2.0 和1.0 !g /L。本方法简单、准确、灵敏，适合于莽草毒素中毒样品的测定。

制备^[1]

150 g 红茴香果实经石油醚脱脂、甲醇提取，浓缩提取物除去甲醇，残渣溶于水，再用乙酸乙酯萃取，萃取物经硅胶柱多次层析，氯仿-甲醇( 97 ∶ 3，V /V) 洗脱，得无色针晶( 30 mg) ，ESI－质谱图见图：

主要参考资料

[1] 超高效液相色谱串联质谱联用法快速测定生物样品中莽草毒素